[发明专利]一种新的多肽——核仁纤维蛋白10.78和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——核仁纤维蛋白10.7 8，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

核仁复合结构的形成是相应核糖体集聚所必须的[Hadjiolov，A.A.1985.

The Nucleolus and Ribosome Biogenesis.Springer Verlag，Wien.1-268]。虽然核蛋白在核糖体形成中的具体作用了解得还不多，但是已经有几种核蛋白已经被确认位于不同亚核仁的相同区域。其中有一个分子量为34-36kD的核蛋白是核糖体形成的一个关键成分，同时因为位于高密度纤维成分(DFC)，故被命名为核仁纤维蛋白。

在研究酵母菌芽孢时发现一个分子量为38kD的核蛋白，NOP1蛋白，它是一个酵母必须核蛋白，它与小核RNA连接是核糖体合成所必须的，并且其免疫活性与脊椎动物的核仁纤维蛋白相关[Schimmang，T.，D.

Tollervey，H.Kern，R.Frank，and E.C.Hurt.1989.EMBO J.8：4015-4024]。NOP1蛋白的甘氨酸/精氨酸N末端富含结构域与其他的核蛋白在氨基酸水平上有比较大的相似性，这些其他的核蛋白包括SSB1、核仁蛋白和小鼠核仁纤维蛋白。酵母NOP1是一个生长所必须的丰富蛋白，同时也是前体rRNA修饰和调控的必须蛋白，这表明它可能是核仁结构和功能的一个重要组成成分。因此，酵母NOP1和脊椎动物核仁纤维蛋白在真核生物核仁中都具有保守功能。

酵母NOP1与人的核仁纤维蛋白在氨基酸水平上分别有70％的相同性和80％的相似性。如此高的保守程度只在几种真核持家蛋白，如遍在蛋白(96％)、肌动蛋白(89％)和β微管蛋白(75％)中出现，而上述这些蛋白几乎在所有的真核细胞功能中都起着非常重要的作用。NOP1和核仁纤维蛋白一个共同的显著特征是一段位于N末端的大约80个氨基酸残基的由富含甘氨酸和精氨酸的重复基元组成的片段。在核仁纤维蛋白中，该片段被精氨酸二甲基化[Lishwe，M.A.，R.L.Ochs，R.Reddy，R.G.Cook，L.G.Yeoman，et al.，1985.J.Biol.Chem.260：14304-14310]。

总之，核仁纤维蛋白在组织核仁结构中起着重要作用。因此，它表达的正常与否将直接影响细胞核的结构和功能。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与核仁纤维蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为核仁纤维蛋白10.78。

由于如上所述核仁纤维蛋白10.78蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的核仁纤维蛋白10.78蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新核仁纤维蛋白10.78蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——核仁纤维蛋白10.78以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码核仁纤维蛋白10.78的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码核仁纤维蛋白10.78的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产核仁纤维蛋白10.78的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——核仁纤维蛋白10.78的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——核仁纤维蛋白10.78的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与核仁纤维蛋白10.78异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；