[发明专利]一种新的多肽——人液泡蛋白17.27和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人液泡蛋白17.27，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核生物通过内吞作用和外排作用完成大分子与颗粒性物质的跨膜运输。在转运过程中，物质包裹在脂双层膜围绕的囊泡中，因此又称膜泡运输。在膜泡运输中，囊泡及脂膜选择性的与蛋白质结合，其中之一就是通过液泡蛋白(Vacuolarprotein)这一载体蛋白完成。

通过液泡蛋白的蛋白质转运过程有四个步骤。第一，液泡蛋白通过配位键与受体蛋白结合。第二，液泡蛋白-受体蛋白复合体与前液泡(prevacule)融合。第三，在蛋白酶水解作用下，液泡蛋白与受体蛋白分离。第四，受体蛋白进入液泡，而液泡蛋白得到再循环。

对人白细胞的液泡蛋白(hlVPS45)的研究证明，该蛋白在人的大部分组织中均有分布，且在外周血单核细胞，嗜中性细胞，心，脾以及睾丸中有大量表达。染色图谱的研究显示h1VPS45位于人染色体1长臂的q21-q22区。

Vac8p是一种和液泡遗传性有关的液泡蛋白。分子量约64KD，主要存在于液泡膜上，有两种存在形式，十四烷酰化和十六烷酰化。有趣的是，十四烷酰化的Vac8p与液泡遗传性无关，而十六烷酰化的则密切相关。(Cell Biol 1998 Mar9；140(5)：1063-74)

Ssu21是一种可以改变细胞膜结构的突变基因，它编码一种新的液泡蛋白。Ssu21很可能通过蛋白激酶C途径来影响膜结构的完整性。(Yeast.1999Oct；15(14)；1485-501)

根据对已有的Vam7p蛋白的结构分析，发现其包含一个卷曲螺旋域，类似于神经元t-SNARE中卷曲螺旋域结构。(Mol Cell Biol 1998 Sep；18(9)：5308-19)

液泡蛋白在高尔基体到溶酶体及高尔基体到质膜表面的转运过程中，细胞质(包括RNA，蛋白质等)的自噬作用及液泡的融合、遗传性，pH和渗透调节等方面也具有一定影响。

已经证明hlVPS45在医学上的重要性主要表现为控制炎症介质的释放，如组胺，缓激肽和细胞因子等。(Int J Biochem Cell Biol.1999 Jun；31(6)：683-94)

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人液泡蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人液泡蛋白17.27。

由于如上所述人液泡蛋白17.27蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人液泡蛋白17.27蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人液泡蛋白17.27蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人液泡蛋白17.27以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人液泡蛋白17.27的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人液泡蛋白17.27的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人液泡蛋白17.27的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人液泡蛋白17.27的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人液泡蛋白17.27的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人液泡蛋白17.27异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有8EQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。