[发明专利]一种新的多肽——神经膜相关蛋白56.10和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——神经膜相关蛋白56.10，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

磷脂酶D(PLD)超家族蛋白成员都包含一个保守基元HXKXXXX

D，该基元是哺乳动物PLD催化功能所必须的[Kooni，E，V.(1996)Tren

Ds Biochem.Sci.21，242-243]。PLD酶在哺乳动物信号传导和膜泡运输中起着非常重要的作用。例如在磷酸肌醇信号通路中，激素与7次跨膜受体结合活化G蛋白，G蛋白活化磷脂酶C(PLC)，PLC使4，5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)断裂成1，4，5三磷酸肌醇(IP3)和二酰基甘油(DG)。IP3通过细胞质扩散与细胞内钙库(如内质网等)、膜上IP3敏感的IP3受体(IP3敏感的钙通道)结合，引起钙离子从钙库中释放到细胞质中，通过钙调节蛋白引起细胞反应。DG与钙离子活化PKC，PKC磷酸化蛋白引起细胞反应。

生物学家新发现了一个新的分子量为54kDa的鼠类多肽，该蛋白可能是PLD超家族的膜相关蛋白，被命名为SAM-9蛋白。SAM-9蛋白与牛痘病毒、Caenorhabditis elegans和Dictyostelium discoideum中的同系物分别有40％、30％和29％的氨基酸相同性，属于PLD同系物亚家族。该亚家族中的第二个HXKXXXXD基元是不完整的，保守天门冬氨酸替换成谷氨酸。

SAM-9基因有多余8个的外显子，两个HXKXXXXD基元都是由两个高度保守的外显子编码的[Karen M.Pedersen，Bente Finsen，Julio E.Celis，and NielsA.Jensen(1998)J.Biol.Chem.273(47)，31494-31504]。

SAM-9蛋白有8个可能的十四烷酰化位点，在氨基酸残基37和52之间有两个信号序列。SAM-9蛋白C末端的异戊二烯化位点和一个N末端的十四烷酰化位点表明该蛋白定位于细胞膜。

SAM-9蛋白在大脑中的表达多余其他非神经组织，因此可能主要起源于神经。SAM-9蛋白启动于前脑的神经原，在神经发生的后期开始表达。因此，SAM-9蛋白是一种神经膜相关蛋白。

本发明人的多肽与神经膜相关蛋白(SAM-9蛋白)在氨基酸水平上分别有39％的相同性和59％的相似性，并具有相似的结构特征，与神经膜相关蛋白同属于PLD同系物亚家族，故命名为神经膜相关蛋白神经膜相关蛋白56.10，同时推测其具有相似的生物学特征。

由于如上所述神经膜相关蛋白56.10蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的神经膜相关蛋白56.10蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新神经膜相关蛋白56.10蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——神经膜相关蛋白56.10以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码神经膜相关蛋白56.10的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码神经膜相关蛋白56.10的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产神经膜相关蛋白56.10的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——神经膜相关蛋白56.10的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——神经膜相关蛋白56.10的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与神经膜相关蛋白56.10异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。