[发明专利]一种新的多肽——人B－级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

许多真核生物细胞表面蛋白由一种糖基磷脂酰基醇(GPI)锚钩附着于膜上，后者共价连接于表面蛋白的羧基端。至少有50种哺乳动物蛋白，例如细胞表面水解酶，粘附分子，受体以及其他抗原分子是GPI锚定的。GPI锚钩的核心主链在各真核生物物种间是高度保守的，并且具有相同的结构，乙醇胺-磷酸-6甘露糖alphal，2甘露糖alphal，6甘露糖alphal，4N-乙酰葡糖胺，6肌醇11-磷脂。在各种类型的生物以及细胞中，这种核心主链由侧链基团以及各种类型的脂类修饰。GPI锚构的前体是在内质网中合成的，它先装配后翻译地连接到内质网中的肽链上。成为GPI锚钩的新生肽链在羧基端有一个信号序列，它定向GPI的锚定(Kinoshita，T.，Inoue，N.And Takeda，J.(1995)Adv.Immunol.，60，57-103)。

近来有研究发现一种人类PIG-B(B-级互补型磷脂酰基醇聚糖)基因参与第三个甘露糖的转运。PIG-B编码一个内质网跨膜蛋白，它具有一个在胞质一侧约60个氨基酸的氨基端部分以及一个大的在内质网腔中的羧基端部分。一个变异的缺乏胞质部分的PIG-B仍然具有活性，这表明PIG-B的功能性位点位于内质网膜的内腔侧。PIG-B基因位于染色体15的q21-22处(M.Takahashi，N.Inoue，K.Ohishi，Y.Maeda，N.Nakamura，Y.Endo，T.Fujita，J.Takeda and T.Kinoshita，EMBO J 15(16)，4254-4261(1996))。

该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断兼防治各种与细胞表面蛋白转运相关的疾病例如血红蛋白尿以及糖尿病等。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33。

由于如上所述人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人B-级互补型磷脂酰基醇聚糖11.33异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。