[发明专利]一种新的多肽——人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人尿嘧啶单核苷酸合成酶是一种具有两种功能的酶，催化嘧啶从头合成的最后两步。它同时具有乳清酸磷酸核糖转移酶(orotatephosphoribosyltransferase，OPRT))以及乳清酸核苷-5’-单磷酸脱羧酶(orotidine-5′-monophosphate decarboxylase，ODC)的活性。这两种酶活性缺失任何一种都会导致遗传性乳清酸酸尿(hereditary orotic aciduria)。这是一种罕见的体细胞隐性遗传疾病，特征是生长缓慢，贫血，以及尿液中含乳清酸过高。在日本的乳清酸尿酸患者中发现几种UMP合成酶的突变，例如在一个等位基因中有R96G(A到G的转换)和G429R(G到C颠换)，在另一个等位基因中则有V109G(T到G颠换)。【Am J Hum Genet 1997 Mar；60(3)：525-39】

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人尿嘧啶单核苷酸合成酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77。

由于如上所述人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中408-731位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1252位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人尿嘧啶单核苷酸合成酶11.77蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。