[发明专利]一种新的多肽——醛－酮还原酶8.8和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——醛-酮还原酶8.8，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

醛-酮还原酶家族包括结构与功能上相关的NADPH-依赖的氧化还原酶及一些其他的酶类：醛还原酶；醛糖还原酶；3-alpha-羟基类固醇脱氢酶，通过将5-alpha-二氢睾酮转变为3-alpha-雄烷二醇来终止雄激素反应；前列腺素F合酶，催化前列腺素H2与D2还原为F2-alpha；十氯酮还原酶，还原杀虫剂十氯酮(商品名Kepone)为对应的乙醇；2，5-二酮-D-葡糖酸还原酶，催化2，5-二酮葡糖酸为2-酮-L-葡糖酸，一种产生抗坏血酸的主要中间物；反-1，2-二氢苯-1，2-二醇脱氢酶；3-氧代-5-beta-固醇4-脱氢酶，催化delta(4)-3-氧代固醇的还原(Bohren K.M.，Bullock B.，WermuthB.，Gabbay K.H.，J.Biol.Chem.264：9547-9551(1989))。上述蛋白都具有约300个氨基酸残基。该家族成员具有三个保守的特征序列模板：G-[FY]-R-[HSAL]-[LIVMF]-D-[STAGC]-[AS]-x(5)-E-x(2)-[LIVM]-G，位于N-端；[LIVMFY]-x(9)-[KREQ]-x-[LIVM]-G-[LIVM]-[SC]-N-[FY]，位于中间部分；[LIVM]-[PAIV]-[KR]-[ST]-x(4)-R-x(2)-[GSTAEQK]-[NSL]-x(2)-[LIVMFA]，该段模板位于C-端，以赖氨酸残基为中心，这个K是一个活性位点残基，它在醛糖以及醛还原酶中的化学修饰影响催化效果(Bruce N.C.，Willey D.L.，Coulson A.F.W.，Jeffery J.，Biochem.J.299：805-811(1994))。

本发明的多肽含有上述两个家族的特征序列模板，且具有相似的生物活性，因而被认为是醛/酮还原酶家族的新成员，其表达异常将引发唐氏综合征等疾病，并与痴呆的恶化有关，该多肽及其抑制剂，激动剂，拮抗剂可用与诊断兼防治与醛糖还原有关的疾病，例如家族性遗传性非息肉病结肠癌(HNPCC)等疾病。

由于如上所述醛-酮还原酶8.8蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的醛-酮还原酶8.8蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新醛-酮还原酶8.8蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——醛-酮还原酶8.8以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码醛-酮还原酶8.8的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码醛-酮还原酶8.8的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产醛-酮还原酶8.8的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——醛-酮还原酶8.8的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——醛-酮还原酶8.8的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与醛-酮还原酶8.8异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中414-656位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1077位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。