[发明专利]一种新的多肽——着丝粒动粒蛋白20.68和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——着丝粒动粒蛋白20.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

复制染色体包含两个不连续的复合大分子集聚体和动粒，动粒位于复制染色体着丝粒区域的相反位置。最近一些研究已经确定了几种在着丝粒结构、着丝粒形成以及姐妹染色单体分离过程中起重要作用的动粒蛋白[Dobie，K.W.，Hari，K.L.，Maggert，K.A.，and Karpen，G.H.(1999)Curr.Opin.Genet.Dev.9，206-217]。

位于动粒之间的着丝粒异染色质包含许多alpha卫星DNA，着丝粒动粒蛋白CENP-8[Cooke，C.A.，Bernat，R.L.，and Earnshaw，W.C.(1990)J.Cell.Biol.110，1475-1488]以及一个着丝粒内部蛋白INCENP[Mackay，A.M.，Ainsztein，A.M.，Eckley，D.M.，and Earnshaw，W.C.(1998)J.Cell.Biol.140，991-1002]。免疫电镜分析显示动粒由四个不同的结构组成横截面：(1)致密的外层，厚约40nm，(2)低密度的中层，(3)致密的内层，(4)外板表面的纤维状冠。内层与着丝粒异染色质紧密连接，并且包含CENP-C，该蛋白是维持功能性动粒和CENP-G所必须的[Tomkiel，J.，Cooke，C.A.，Saitoh，H.，Bernat，R.L.，Earnshaw，W.C.(1994)J.Cell Bioll25，531-545]。

现在生物学家又发现了一个新的着丝粒动粒蛋白CENP-H。该蛋白大约分子量为33kDa，其多肽具有卷曲盘绕结构和一个核定位信号。CENP-H转录子含量相对较少，但几乎广泛表达于各种组织以及胚胎发育的各个时期。实验表明CENP-H蛋白是特异性的并定位于整个细胞周期的动粒，这表明该蛋白可能在整个细胞周期过程中对着丝粒的组成和功能起重要作用。

本发明人的多肽与着丝粒动粒蛋白CENP-H在氨基酸水平上分别有69％的相同性和84％的相似性，并具有相似的结构特征，同属于着丝粒动粒蛋白家族，故命名为着丝粒动粒蛋白着丝粒动粒蛋白20.68，同时推测其具有相似的生物学特征。

    由于如上所述着丝粒动粒蛋白20.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的着丝粒动粒蛋白20.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与着丝粒动粒蛋白CENP-H20.68异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。