[发明专利]一种新的多肽——丝氨酸蛋白酶11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——丝氨酸蛋白酶11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

谷物种子包含大量的丝氨酸蛋白酶抑制剂和α-淀粉酶抑制剂，这些抑制剂由于结构上的相似性可以形成一个家族。这个家族可能通过抑制外源的蛋白酶和淀粉酶来形成对致病菌和入侵者的防御。谷物胰蛋白酶抑制剂和α-淀粉酶抑制剂家族的成员是一些由约120个氨基酸残基组成的蛋白质，其中包含10个Cys残基构成5个二硫键。

这个家族在序列相似性上非常有限，主要存在于Cys残基的数量和分布上，而理化性质(如溶解性)的不同说明它们在进化过程中可能有共同的祖先。其共同序列为C-X(4)-(SAGD)-X(4)-(SPAL)-(LF)-X(2)-C-(RH)-X-(LIVMFY)(2)-X(3，4)-C(三个Cys都参与二硫键的形成)。

谷物胰蛋白酶抑制剂和α-淀粉酶抑制剂家族中的一些可溶于NaCl的清蛋白和球蛋白，与植物过敏病人血清中的IgE结合，这个家族中的一些成员被确认为是哮喘病人的主要过敏原。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与丝氨酸蛋白酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为丝氨酸蛋白酶11。

由于如上所述丝氨酸蛋白酶11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的丝氨酸蛋白酶11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新丝氨酸蛋白酶11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——丝氨酸蛋白酶11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码丝氨酸蛋白酶11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码丝氨酸蛋白酶11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产丝氨酸蛋白酶11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——丝氨酸蛋白酶11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——丝氨酸蛋白酶11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与丝氨酸蛋白酶11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1373-1675位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2887位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制丝氨酸蛋白酶11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与丝氨酸蛋白酶11蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。

本发明还涉及本发明的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于丝氨酸蛋白酶11表达异常所引起疾病的药物的用途。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。