[发明专利]一种新的多肽——人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

环核苷磷酸二脂酶(PDEs)是涉及到许多调控通路的超级酶家族，PDE3家族的特性是与cAMP高度亲合、被cGMP所抑制，对特殊的抑制因子cilostamide与milrinone，敏感，通过磷酸化与活化响应胰岛素及替代物以提高cAMP水平。PDE3家族又称为cGMP-inhibited的cGI PDE。(Miki et al.，1996；Lobbert etal.，1996)。cGI PDE的C端含有保守的结构域，它被证实是催化位点所在区域。PDE3中代表性的PDE3B与PDE3A在这个保守的催化结构域中有一44个氨基酸组成的插入子。这一插入子涉及到催化位点对cGMP的敏感性。(Meacci E etal.，1992；He R et al.，1996)。cGIP1即PDE3B，由16个外显子组成，在基因解码区域存在G/A的多态性，在2个内含子(内含子5与内含子12)中有二核苷酸重复的多态性，PDE3B基因解码1112个氨基酸，它与鼠PDE3B有81％的同源性。northern探针显示它在许多脂肪储存组织中较高表达，在肝、脾、肺、肾中低表达(Miki et al.，1996)。cGIP2即PDE3A，它的cAMP水解活性可被cGMP所抑制(Meacci et al.，1992)，PDE3A在血小板、心肌细胞中高表达，PDE3A的N端的缺失可提高cAMP水解活性。研究认为cGI PDE的N端分歧涉及到底物识别的特异性(Tang et al.，1997)。Tang等人发现PDE3A在血小板、心肌细胞中高表达(Tang et al.，1997)。Miki与Lobbert等人认为PDE3B基因存在的染色体区域涉及肥胖症与非胰岛素依赖的糖尿病(Miki etal.，1996；Lobbert et al.，1996)。研究发现，选择性的cGI PDE抑制因子可用于治疗支气管哮喘与慢性阻塞性肺病(Schmidt D，et al.，1999)其结构域相似于环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族的特征性结构域---C端含有保守的结构域，它是催化位点所在区域；在这个保守的催化结构域中常有一44个氨基酸组成的插入子。基于以上各点，故认为本发明的新基因为一编码人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族的基因，命名为人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶17。并以此推断其具有环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶家族相似的生物学功能。编码人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶17的多聚核苷酸，及其所编码的人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二脂酶17的发现为研究细胞在正常及病理条件下的分化、增殖的生理生化过程提供了一种方法，也为诊断、治疗与细胞分化增殖紊乱而造成的疾病包括癌症提供了一种新途径。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13。

由于如上所述人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人环磷酸鸟嘌呤抑制的磷酸二酯酶9.13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。