[发明专利]一种新的多肽——锌指蛋白10.67和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——锌指蛋白10.67，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

锌指蛋白7(ZNF7)的基因表现为多重转录，能够在许多具有不同胚胎来源的人类细胞系中表达(Lania L，Donti E，Pannuti A et al.，1990)。在人类细胞中，编码锌指蛋白7的基因位于染色体8q24.3，位于该基因周围的染色体区域广泛地甲基化。

锌指蛋白7含有重复的锌指结构域，它是一种转录因子类似的多锌指蛋白，包含了687个氨基酸残基，其分子量大约为78Kd，它能够在许多细胞系中表达。锌指蛋白7包含了15个C2H2锌指结构域，占了整条蛋白的70％(Lania，L.，Donti，E.，Pannuti，A.Et al，1990)，其锌指结构域与DNA和RNA结合锌指有70％的序列相似性，并且与两者的共同序列几乎完全一致(Mattaj，I.W.，1993)。 

除了锌指结构域的核苷酸结合特性，锌指还能够介导蛋白和蛋白之间相互作用(Sun，L.，Liu，A.and Georgopoulos，K.，1996)，也包括锌指区域和亮氨酸拉链结构域的相互作用(Diaz-Meco，M.，Municio，M.M.et al.，1996)。然而，L7和锌指蛋白7的相互作用界面保持着特异性。

虽然目前已经获得了锌指蛋白7在核中的定位(Lania，L.，Donti，E.，Pannuti，A.Et al，1990)，但是也不能排除它存在于细胞质中的可能性。实验发现锌指蛋白7能够与真核细胞的核糖体共同纯化，这就证明了其在核糖体上的定位，并且在核糖体中作为翻译调节器其作用。

另外，在体外，锌指蛋白7还是有丝分裂原活化的蛋白激酶的作用底物(Fukunaga，R.，and Hunter，T.，1997)。但是，在体内，有丝分裂原活化的蛋白激酶介导的锌指蛋白7的磷酸化作用是会否影响锌指蛋白7与L7的结合仍然无从考证。另外，在Burkitt淋巴瘤中，锌指蛋白7表达的缺失导致肿瘤显性(Feduchi E，Gallego MI，Lazo PA，1994)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与锌指蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为锌指蛋白10.67。

由于如上所述锌指蛋白10.67蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的锌指蛋白10.67蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新锌指蛋白10.67蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——锌指蛋白10.67以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码锌指蛋白10.67的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码锌指蛋白10.67的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产锌指蛋白10.67的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——锌指蛋白10.67的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——锌指蛋白10.67的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与锌指蛋白10.67异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中383-676位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1396位的序列。