[发明专利]一种新的多肽——4Fe－4S氧化还原蛋白10.56和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——4Fe-4S氧化还原蛋白10.56，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

有氧条件下ATP的生成是通过一系列的电子传递来完成的，经过一系列的中间物的传递，在真核细胞中，这些中间物都定位于线粒体内膜上。电子传递体主要包括黄素蛋白、铁硫蛋白、细胞色素和一种醌化合物，出来醌化合物以外其它都是疏水性分子。了解的最清楚的铁硫蛋白是细菌和叶绿体的铁氧化还原蛋白，线粒体的电子传递链中也有。铁硫蛋白是一族与蛋白质的4个Cys残基复合在一起的含铁和硫原子的蛋白质，也称非血红素铁蛋白。铁硫蛋白的铁和硫通常以等摩尔存在，一般为2Fe-2S或4Fe-4S，但是有些铁蛋白含有一个铁原子，并以四面体形式与4个Cys残基的巯基配位。

4Fe-4S氧化还原蛋白最先从细菌中找到，因此常被称为细菌型铁氧还原蛋白，它包含了若干个约26氨基酸残基的区段，每一区段都有四个Cys残基，能结合到铁硫中心。目前已经发现有许多与细菌型铁氧蛋白非常相似的蛋白，含有一个或多个4Fe-4S结合区域。4Fe-4S氧化还原蛋白家族的铁硫结合区域，一般都是这样一段保守的氨基酸序列：Cys-X(2)-Cys-X(2)-Cys-X(3)-Cys-[PEG]。结合区域的铁原子能够以氧化状态(Fe3+)或还原状态(Fe2+)存在，铁硫蛋白作为电子传递体发挥作用时，铁实际上是电子的受体或供体。

比较常见的铁硫蛋白比如琥珀酸盐脱氢酶复合物和延胡索酸盐还原酶复合物，这些酶复合物是三羧酸(TCA)循环的重要成员，它们都包含了三个亚基：黄素蛋白、铁硫蛋白、细胞色素，铁硫蛋白包含在从琥珀酸到辅酶Q和从辅酶Q到细胞色素的电子传递过程之中；NADH脱氢酶是一个具有2Fe-2S和4Fe-4S两个中心的铁硫蛋白。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与4Fe-4S氧化还原蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为4Fe-4S氧化还原蛋白10.56。

由于如上所述4Fe-4S氧化还原蛋白10.56蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的4Fe-4S氧化还原蛋白10.56蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新4Fe-4S氧化还原蛋白10.56蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——4Fe-4S氧化还原蛋白10.56以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码4Fe-4S氧化还原蛋白10.56的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码4Fe-4S氧化还原蛋白10.56的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产4Fe-4S氧化还原蛋白10.56的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——4Fe-4S氧化还原蛋白10.56的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——4Fe-4S氧化还原蛋白10.56的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与4Fe-4S氧化还原蛋白10.56异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中479-769位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2242位的序列。