[发明专利]一种新的多肽——人支链alpha－酮酸脱氢酶(BCKDH)E1－beta亚基11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

alpha-酮酸的氧化脱羧反应，释放CO2并产生对应的乙酰辅酶A以及NADH，BCKDH是一种多酶复合物，由三种功能性复合物构成，这三种组分是：脱羧酶E1，转酰基酶E2，以及硫辛酸酰脱氢酶E3。纯化后的BCKDH含有四条多肽链，分别是E1alpha，E1beta，E2，以及E3。(Perham，R.N.，1991，Biochemistry，30：8501-8512)

支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)复合物E1beta亚基中的一种缺陷是导致槭糖尿病(MSUD)的一种原因。研究分离自胎盘细胞中的BCKDH复合物E1beta亚基前体的DNA，发现在其核苷酸序列中含有一段几个核苷酸的5’-未翻译序列，一千多个翻译的核苷酸序列以及一百多个未翻译的3’-未翻译序列。该亚基被作为前体而合成，具有一个50个氨基酸的前导序列，并在NH2端进行加工。BCKDH-E1beta的主要结构与人丙酮酸脱氢酶复合物的E1beta亚基的所有区域都具有同源性。

槭糖尿病(MSUD)患者体内未发现存在有正常的支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)复合物E1beta亚基，因而支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)复合物E1beta亚基的基因发生缺失或突变将会引发槭糖尿病(MSUD)等多种疾病(Nobukuni，Y.，Mitsubuchi，H.，Endo，F.，Akaboshi，I.，Asaka，J.and Matsuda，I.，J.Clin.Invest.86(1)，242-247(1990))。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11。

由于如上所述人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人支链alpha-酮酸脱氢酶(BCKDH)E1-beta亚基11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。