[发明专利]一种新的多肽——人alpha2,3－唾液酸转移酶(ST3GalVI)12.76和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)12.76，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

这些酶催化唾液酸从胞苷一磷酸-N-乙酰神经氨酸(CMP-NeuAc)转移至糖蛋白以及糖脂的糖链末端位置。末端的乙酰神经氨酸(NeuAc)残基是参与各种生物进程的糖类的关键性决定因素，并广泛分布于多种类型的细胞中(Varki，A.(1992)Curr.Opin.Cell Biol.4，257-266)。例如，唾液酸-Lewis X决定因子是三个已知选择蛋白(选择性的细胞粘着分子)(E-，P-以及L-选择蛋白)的配体，这些选择蛋白是参与对淋巴组织补充白细胞的细胞粘着分子，还是炎症的位点(Valki，A.(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.91，7390-7397)。此外，唾液酸-Lewis X决定因子的表达增强导致癌细胞的转移。参与合成唾液酸-Lewis X决定因素结构的糖基转移酶是betal，3-N-乙酰氨基葡糖转移酶；betal，4-半乳糖基转移酶；alpha1，3-岩藻糖基转移酶，以及alpha2，3-唾液酸转移酶。

迄今为止已发现了五种不同的alpha2，3-唾液酸转移酶，它们具有不同的受体底物特异性。ST3Gal I以及II合成对于许多O-连接寡糖与类似GM1b，GD1a，以及GT1b等的糖脂普遍的NeuAc alpha2，3Gal beta1，3GalNAc序列。ST3Gal III形成一个较为少有的序列，NeuAc alpha2，3Gal betal，3GlcNAc。ST3Gal IV能够形成存在于糖蛋白以及糖脂的糖类部分的末端NeuAc alpha2，3Galbetal，3GalNAc以及NeuAc alpha2，3Gal betal，4GlcNAc序列。ST3Gal V(GM3合酶)，只对LacCer具有活性。在迄今为止得到的五种alpha2，3-唾液酸转移酶中，人ST3Gal III及IV参与形成唾液酸-Lewis X决定因子(Sasaki，K.，Watanabe，E.，Kawashima，K.，Sekine，S.，Dohi，T.，Oshima，M.，Hanai，N.，Nishi，T.，and Hasegawa，M.(1993)J.Biol.Chem.268，22782-22787)。

近来又发现一种新的alpha2，3-唾液酸转移酶，被称为ST3Gal VI。ST3Gal VI是一种新的Gal betal，4GlcNAc alpha2，3-唾液酸转移酶，它对于作为糖脂底物的新乳酸四神经酰胺以及新乳酸六神经酰胺具有高度特异性。此外，ST3Gal VI更倾向于含有Gal betal，4GlcNAc结构的寡糖酶而不是含有Gal betal，3GlcNAc结构的寡糖酶，表明它参与合成唾液酸-副球蛋白，后者是一种糖蛋白以及糖脂上唾液酸-Lewis X决定因子的前体。ST3Gal VI参与黑素瘤中的唾液酸-Lewis X决定因子的合成，并参与合成胎盘中的SPG，ST3Gal VI基因则正调节结肠癌以及造血恶性细胞中的唾液酸-Lewis X决定因子的合成(Okajima，T.，Fukumoto，S.，Miyazaki，H.，Ishida，H.，Kiso，M.，J.Biol.Chem.274(17)，11479-11486(1999))。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)12.76。

由于如上所述人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)12.76蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)12.76蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人alpha 2，3-唾液酸转移酶(ST3 Gal VI)12.76蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。