[发明专利]一种新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

表达于雌激素(E)和羟基-二苯氧胺(HT)调节的人乳腺上皮细胞(HMEC)中，生物学家最近发现的一个新蛋白又表达于雌激素受体的表达过程，该蛋白取名为雌激素效应B盒蛋白(EBBP)。EBBP有564个氨基酸残基有一个结构基元，该基元包含两个半胱氨酸和组氨酸富含B盒结构域和一个卷曲螺旋区域，该螺旋区域是B盒锌指蛋白家族的特征，该蛋白家族成员表达于各种生物过程，包括细胞的生长和分化[Cao T，Shannon M，Handel MA，Etkin LD 1996.Dev Genet19：309-320]，转录调节[LeDouarin B，Zechel C，Garnier JM，Lutz Y，Tora L，etal.，1995.EMBO J14：2020-2033]等等。大多数该家族蛋白都有一个N末端锌指结构。EBBP因为没有这个结构域而属于B盒包含蛋白亚家族，该家族蛋白包括ATDC、pyrin、KIAA0129和1A1.3B/Nb r1[Henry J，Ribouchon M，Depetris D，Mattei M，etal.，1997.Immunogenetics 46：383-395]。在这些蛋白中只有EBBP、pyrin和KIAA0129包含一个C末端170个氨基酸的B30.2结构域[Henry J，RibouchonMT，Offer C，Pontarotti P 1997.Biochem Biophys Res Commu N 235：162-165]。嗜乳酯蛋白的B30.2结构域已经被证明与乳汁的分泌有关，并且pyrin B30.2结构域的错义突变与家族地中海发热直接相关。在EBBP的生化功能中，B30.2结构域起着重要的作用。

Northem杂交实验表明，EBBP广泛表达于除肝脏和外部血淋巴细胞以外几乎所有组织，并且其基因定位于人染色体17p11.2。与大多数B盒家族蛋白成员相比，EBBP有一个主要的细胞质位点。

EBBP基因在永生的非肿瘤HMEC表达外生ER中是一个修饰基因。与其他E和HT效应基因不同的是，EBBP基因的修饰作用没有DNA结合能力[Hsiao-LaiC.Liu，Elina GoldEr-Novoselsky，Marian H.Seto，Lynn Webster etal.，1998.Mol.Endocrinol.12(11)，1733-1748]。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人蛋白磷酸酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人蛋白磷酸酶13.64。

由于如上所述人蛋白磷酸酶13.64蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白磷酸酶13.64蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白磷酸酶13.64蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白磷酸酶13.64以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶13.64的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶13.64的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白磷酸酶13.64的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人蛋白磷酸酶13.64的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人蛋白磷酸酶13.64的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人蛋白磷酸酶13.64异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：