[发明专利]一种新的多肽——酰胺酶家族蛋白9.68和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——酰胺酶家族蛋白9.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在众多原核生物及真核生物的器官中存在一类酶，该类酶在酰胺基的水解及转运过程中起重要作用，催化酰氨基的水解及转移，该酶被称之为酰胺酶。来自不同生物的酰胺酶在进化上有高度的相关性。酰胺基的转移在生物体内涉及生物体内糖酵解途径、磷酸己糖途径、戊糖磷酸途径及三羧酸循环等多种重要的中心代谢途径。因而，该酶家族的成员在生物体内有着极其广泛生理学功能，调节着多种代谢途径。

1990年，Mayaux J.F.等人从Brevibacterium中克隆得到了一酰胺酶，该酶与酰胺酶家族的其它成员均具有较高的同源性。该酶在核糖体氨酰-tRNA的形成过程中亦起着十分重要的作用，其序列中含有一核糖体结合位点，通过这一位点结合到核糖体上，并与tRNA结合以调节新生肽链的转运过程。该蛋白的表达异常将导致核糖体肽链合成过程的异常及引发各种相关的疾病[Mayaux J.F.，Cerebelaud E.et al.，1990，J Bacteriol，172：6764-6773]。

不同来源的酰胺酶的中心均含有一富含甘氨酸、丝氨酸和丙氨酸残基的高度保守的区域，该区域由如下所示的一致性序列片段组成：

G-[GA]-S-S-[GS]-G-X-[GSA]-[GSAVY]-X-[LIVM]-[GSA]-X(6)-[GSA]-X-[GA]-X-D-X-[GA]-X-S-[LIVM]-R-X-P-[GSAC]；

所有的酰胺酶家族的成员均含有这一高度保守的序列片段。该序列片段是酶的重要活性中心，其中一些特殊氨基酸位点的突变将导致酶的表达异常或失活，从而影响酶在生物体内的催化活性，导致一些相关的代谢途径的紊乱及肽链合成途径的异常。该酶家族的成员的表达异常通常将引发一些与肽链合成调控紊乱相关的疾病。其与生物体内一些相关的糖代谢紊乱症、氨基酸代谢紊乱症及一些相关的物质代谢紊乱症等疾病的发生相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与酰胺酶家族蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为酰胺酶家族蛋白9.68。

由于如上所述酰胺酶家族蛋白9.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的酰胺酶家族蛋白9.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新酰胺酶家族蛋白9.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——酰胺酶家族蛋白9.68以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码酰胺酶家族蛋白9.68的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码酰胺酶家族蛋白9.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产酰胺酶家族蛋白9.68的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——酰胺酶家族蛋白9.68的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——酰胺酶家族蛋白9.68的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与酰胺酶家族蛋白9.68异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中668-934位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1149位的序列。