[发明专利]一种新的多肽——人NPAT蛋白10.01和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人NPAT蛋白10.01，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人NPAT是一种基本的生理功能基因，即“管家”基因，它位于人类染色体11上的ATM基因的上游部位。ATM基因也是一种与之相类似管家基因，与一种常染色体隐性基因紊乱——毛细血管扩张共济失调(Ataxia telangrectasia，AT)有关。NPAT基因和ATM基因是相连的基因单位，沿着相反的方向转录，并且共享0.5Kb的5’侧序列。

对装载有NPAT基因的装配型质粒克隆进行直接的序列测定，得到了NPAT的序列结构。NPAT至少有44Kb，其中包含了18个外显子和17个内含子。

在癌症的发展阶段上，AT杂合子能够增加癌症的危险性，尤其是在妇女乳腺癌、子宫颈癌中。但是，经常会在乳腺癌、子宫颈癌相对应的染色体11q22—q24位点处发现其丧失杂合性，这种现象表明：11q22—q24区段上有一个癌症遏制基因的存在(Imai T，Sugawara T，Nishiyama A，1997)。

另外还发现，NPAT基因与细胞周期密切相关。NPAT是细胞周期蛋白E-CDK2的底物，在细胞周期中对于S期的到来有决定作用。在体内，NPAT蛋白能够与细胞周期蛋白E-CDK2发生结合，并且被E-CDK2所磷酸化，其蛋白表达水平的最高点出现在细胞周期G1期向S期转变的过渡阶段上。NPAT蛋白的超表达通常加速了S阶段的到来，当E-CDK2细胞周期蛋白也共同表达后这种影响会更加明显(Zhao J，Dynlacht B，Imai T，Hori T，Harlow E，1998)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人NPAT蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人NPAT蛋白10.01。

由于如上所述人NPAT蛋白10.01蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人NPAT蛋白10.01蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人NPAT蛋白10.01蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人NPAT蛋白10.01以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NPAT蛋白10.01的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人NPAT蛋白10.01的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人NPAT蛋白10.01的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人NPAT蛋白10.01的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人NPAT蛋白10.01的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人NPAT蛋白10.01异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中812-1087位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2194位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。