[发明专利]一种新的多肽——人纤溶酶原激活物抑制剂2－13.43和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

纤溶酶原激活物抑制剂2是一种丝氨酸蛋白水解酶抑制物，在生物体内通过抑制尿激酶及组织纤溶酶原活性物的作用活性来调控纤溶酶的形成。与其它的丝氨酸蛋白水解酶抑制物相似，纤溶酶原激活物抑制剂2以1：1的比例与相应的丝氨酸蛋白水解酶结合，以形成没有活性的蛋白水解酶复合物，以抑制蛋白水解酶在体内的作用活性[Richard D.Ye，Shawn M.Ahern et al.，1989，J BiolChem，264：5495-5502]。

纤溶酶原是一种常见的丝氨酸蛋白水解酶，在生物体内参与多种不同的生理学过程，包括血纤维蛋白溶解作用、组织重建、炎症反应及肿瘤转移等。纤溶酶原激活物抑制剂2通过调控纤溶酶原的形成来参与调节上述各种重要的生理过程。在生物体内，纤溶酶原激活物抑制剂2通常由周边血单细胞的内毒素及肿瘤细胞来刺激其表达与合成。纤溶酶原激活物抑制剂2的表达异常通常将导致生物体内相应的纤溶酶原的表达异常，从而影响如上所述的各种与之相关的生理学过程的异常。

研究发现，纤溶酶原激活物抑制剂2与鸡的卵清蛋白非常相似，两者在体内的分泌均不需信号肽的存在，且均在母体受孕期间的子宫内高表达，由两者的结构与生物学活性的相似性，认为两者在进化上亦存在着一定的相关性。1987年，Ye等人从人中克隆得到了一纤溶酶原激活物抑制剂2蛋白，该蛋白的氨基酸序列中含有三个潜在的N-糖基化位点，而其380位的精氨酸残基位点和381位的苏氨酸残基位点是一典型的丝氨酸蛋白酶抑制作用中心[Ye R.D.，Ahern S.M.etal.，1989，J Biol Chem.，264：5495-502]。该蛋白在体内的表达受多种细胞因子、激素及佛波酯类物质的共同调节。

由上可知，纤溶酶原激活物抑制剂在生物体内调控着各种相关的纤溶酶原蛋白的作用活性，而纤溶酶原在生物体内参与多种重要的生理过程，如细胞组织重建、各种炎症反应及肿瘤细胞的转移等。纤溶酶原激活物抑制剂在生物体内正是通过调控纤溶酶原蛋白的形成来参与调控各种相关的过程的发生，该蛋白的表达异常将导致纤溶酶原的表达异常，进而影响一系列与之相关的生理过程的发生。该蛋白在生物体内通常与各种相关的炎症反应、相关组织的肿瘤及癌症、胚胎发育紊乱性疾病等的发生等密切相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人纤溶酶原激活物抑制剂的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43。

由于如上所述人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人纤溶酶原激活物抑制剂2-13.43异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。