[发明专利]一种新的多肽——人锌指蛋白315－11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人锌指蛋白315-11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

C2H2型锌指结构是由两对恒定的Cys和His残基及一个锌离子相互作用构成的(A.D.Frankel，J.M.Berg，C.O.Pabo，1987)。这种锌指结构能够在许多转录因子中找到，而这些转录因子在控制细胞生长、细胞分化或发育中产生影响(T.E1-Baradi，T.Pieler，1991)。锌指蛋白315属于C2H2型锌指蛋白。

锌指蛋白315含有683个氨基酸，在翻译起始位点之前有一个框内TGA终止密码子，在核苷酸序列的第3232-3237处存在一个AATAAA多聚腺苷酸信号。蛋白的羧基末端含有9个C2H2型锌指结构域，这些结构域被分为三个单位：第一个单位(380-400)包含1个C2H2结构域；第二个单位(436-540)包含4个C2H2结构域；第三个单位(577-681)也包含4个C2H2结构域。在锌指结构域中，Cys和His残基是高度保守的，每个锌指结构域都有如下的一致性序列：C-X2-C-X3-F-X5-L-X2-H-X3-H。第二和第三个单位之间由高度保守的H/C相互连接，其一致性序列为T-G-E-K-P-Y-X(R.Schuh，W.Aicher et al.，1986)。

锌指蛋白315的N末端部位含有一个富含Leu的区域LeR(G.Pengue，V.Calabro et al.，1994)，在许多锌指蛋白中非常保守。LeR富含Leu和Glu，证明它能够形成一个在一般转录因子中都能找到的带有负电荷的区域。并且还包含了两个alpha螺旋结构，表明它可能介导蛋白与转录机制相关组分的相互作用。

KRAB区域在大约三分之一的C2H2型锌指蛋白中存在并且高度保守(E.J.，Bellefroid，D.A.Poncelet et al.，1991；M.Rosati，M.Marino et al.，1991)，包括KRAB-A和KRAB-B两种。315只含有KRAB-A区域，作为转录遏制区域发挥作用(G.Pengue，V.Calabro et al.，1994；R.Witzgall，E.Olearyet al.，1993)。

锌指蛋白315的mRNA在许多婴儿和成人组织中表达，包括人类的肿瘤细胞系和淋巴细胞系等等，这种广泛的表达证明，315在基础细胞事件中起着非常重要的作用，包括蛋白的合成、细胞的新陈代谢(P.J.Mitchell，R.Tjian，1989)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人锌指蛋白315的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人锌指蛋白315-11。

由于如上所述人锌指蛋白315-11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人锌指蛋白315-11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人锌指蛋白315-11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人锌指蛋白315-11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白315-11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白315-11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人锌指蛋白315-11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人锌指蛋白315-11的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人锌指蛋白315-11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人锌指蛋白315-11异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：