[发明专利]一种新的多肽——人核转换蛋白41.69和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人核转换蛋白41.69，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

精子形成过程是一配子经过逐步地分化，最终形成成熟的精子细胞的过程。在哺乳动物中，精子形成的第一阶段即为精子细胞发育的开始，这一阶段与染色质结构的变化相关；第二阶段即通过染色质的融合及聚集形成完整的、转录失活的非核小体结构。这一融合过程包含两个蛋白的转变。第一个转换是由许多精子细胞特异蛋白介导的组氨酸变换及替代过程，而这些蛋白在第二个转换过程中被一个或两个脯氨酸所替代。这些精子细胞特异的蛋白在成熟精子形成的第二阶段起着重要的调节作用，这些蛋白的表达异常将导致个体无法形成正常的、成熟的精子，从而引发各种相关的生殖系统疾病[Frederic CHIRAT，Arlette MARTINAGEet al.，Eur.J.Biochem.1991，198：13-20]。

人们早已从大鼠及小鼠中克隆得到了TP1、TP2、TP3及TP4四个转换蛋白，其中对TP1及TP2的研究较为详细。随后人们又从人、牛中克隆得到了与鼠TP1蛋白相似的人及牛TP1蛋白。其中牛TP1蛋白含有一个半胱氨酸残基，而人TP1蛋白与鼠TP1相似，不含半胱氨酸残基。这些蛋白均在这些生物的精子形成过程中发挥重要的调节作用。

核转换蛋白1是精子细胞特异蛋白中的一种，该转换蛋白由54个氨基酸残基组成，其序列在哺乳动物中是高度保守的。我们在第28-34个氨基酸位点找到了一7个氨基酸长的信号片段，这一片段的氨基酸序列如下：S-K-R-K-Y-R-K。该序列片段含有一个酪氨酸残基及四个丝氨酸残基，这四个位点是蛋白磷酸化的作用位点，其中酪氨酸位点在蛋白与DNA相互作用过程中，对染色质的不稳定性是必需的；而丝氨酸位点的磷酸化对于蛋白与DNA的相互作用也是必需的，其可能调节着蛋白正确地结合到DNA的特定位点上。该结构域的表达异常将直接导致蛋白在精子形成过程中的功能异常，从而引发各种相关的生殖系统疾病。

ATP或GTP结合基序是各种ATP/GTP结合蛋白中普遍存在的结构域，一些连接ATP或GTP的蛋白都或多或少含有这一保守的motif序列，该基序具有保守的特征性序列片段：[AG]-X(4)-G-K-[ST](其中X为任意氨基酸残基)。这些motif中最为保守的是glycine富集区域，这一区域在β线与α螺旋之间形成一个易弯曲的环。这一弯曲环通常与核苷酸上的某一磷酸基团反应，该motif序列通常被称为“A”共有序列或P环。该基序在生物体内通常负责与ATP、GTP结合，为蛋白发挥生物学功能提供所需的能量及稳定蛋白在生物体内的结构，协助蛋白完成其正常的生理学功能。其表达异常将直接导致一些蛋白的异常表达及功能异常，从而引发各相关组织的发育紊乱、肿瘤及癌症的发生。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人核转换蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人核转换蛋白41.69。

由于如上所述人核转换蛋白41.69蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人核转换蛋白41.69蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人核转换蛋白41.69蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人核转换蛋白41.69以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核转换蛋白41.69的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人核转换蛋白41.69的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人核转换蛋白41.69的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人核转换蛋白41.69的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人核转换蛋白41.69的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人核转换蛋白41.69异常相关的疾病的方法。