[发明专利]一种新的多肽——人低氧诱导因子1alpha亚基12.76和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物体内存在着一类蛋白，这些蛋白的转录与表达需在低氧的条件下被激活，如促红细胞生成素、内皮素、葡萄糖转运物及糖酵解酶等。该类蛋白的氧敏感性及转录激活机制是相同的，低氧诱导因子1蛋白复合物即是该类蛋白转录表达过程中的一个重要的转录调控因子，调控着这些蛋白在体内的表达，且该蛋白复合物对机体心血管发育及维持系统内环境的稳定也是必需的。当生物体在低氧条件下要转录表达各种相关蛋白时，首先合成大量低氧诱导因子1蛋白复合物，以调控各种基因的表达[S.Morwenna Wood，Michael S.et al.，1998，J Biol.Chem.，273：8360-8368]。

低氧诱导因子1蛋白复合物在生物体内组成性表达，且仅在含氧量低的细胞内表达，以调控相关基因的表达。该蛋白复合物由两个bHLH蛋白组成，其组成亚单位在含氧量正常的细胞内将被泛素-蛋白酶体迅速催化变性；而生物体内低氧、金属离子(如钴、镍、镁等)、铁螯合物及多种抗氧化物等物质则有助于保持蛋白复合物在体内的稳定性及作用活性。[V.Srinivas，X.Zhu et al.，1998，J Biol.Chem.，273：18019-18022]。

人们已克隆得到多种不同来源的低氧诱导因子1蛋白复合物及其亚单位。HIF1A为一编码低氧诱导因子1蛋白复合物α亚单位的基因，该基因编码的蛋白在生物体内参与调控各种低氧表达蛋白的转录过程。1998年，Iyer等人从人中克隆得到了一新的HIF1A基因，该基因与已知的HIF基因有较高的同源性，且具有相似的功能。研究发现，HIF1A蛋白的结构、功能及调节机制在进化上亦是保守，其主要负责调控生物体内各种低氧条件下基因的转录与表达，并在生物体心血管系统的发育及维持内环境稳定等过程中起重要的调控作用[Iyer N.V.，Leung S.W.et al.，1998，Genomics，52：159-165]。该蛋白复合物亚单位在体内表达量过低，可能会导致相关基因的转录抑制，从而引发各种相关的代谢紊乱性疾病；而其表达量的过多亦可能是机体慢性低氧症发生的主要原因[Yu A.Y.，Shimoda L.A.etal.，1999，J Clin Invest，103：691-696]。

由上可知，低氧诱导因子1复合物及其亚单位HIF1A在生物体相关基因的表达与调控过程中起着重要的作用。该蛋白的突变或表达异常将导致生物体内相关基因及其代谢途径的异常，如糖代谢途径异常、心血管系统发育异常等，进而引发各种相关的疾病。该蛋白在生物体内通常与一些心血管发育紊乱性疾病、糖类代谢紊乱性疾病、机体内环境失衡、慢性低氧症及各种相关的物质代谢紊乱性疾病等的发生密切相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人低氧诱导因子1 alpha亚基的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76。

由于如上所述人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人低氧诱导因子1 alpha亚基12.76的抗体。