[发明专利]一种新的多肽——调节蛋白HIV－1Tat相互作用的辅助因子TIP30－39.71和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

调节蛋白Tat能通过增强RNA聚合酶II的最大的亚基的末端羧基结构域的磷酸化程度而增加转录本的延伸，其机制是使RNA聚合酶II的CTD磷酸化。它的这一作用需要与作为Tat特殊辅助因子的初转录本的5′端相互作用，该特殊辅助因子使Tat和含有RNA聚合酶II的SRB发生免疫沉淀反应。早先认为Tat蛋白的辅助因子有TBP-1，TAP，Tip-60和HT2A，但它们并不直接参与Tat的活性。其后又发现一辅助因子Tat-SF1，它是一磷酸化蛋白。

1998年Hua Xiao等人克隆出的Tat的辅助因子TIP30是一全新的因子，它与以前所报道的其它因子没有同源序列。TIP30由七条多肽链组成，其中五条和由EST数据库中随机克隆的人类cDNA所编码的氨基酸相匹配。ORF编码该TIP30的全长蛋白质，该ORF的-3位和+4为都是鸟嘌呤。TIP30是一特殊的激活剂，它可通过与Tat-RNA聚合酶全酶复合物的相互作用，而加强它们的组装。Tat介导的反式激活作用选择性需要TIP30。TIP30在Tat介导的反式激活中的作用与Tat-SF1截然不同，TIP30可能直接可与Tat的激活结构域相联系，其它蛋白质也可能作为中介物或通过对TIP30的共价修饰(如：磷酸化)使Tat与TIP30之间易于作用。TIP30也可能直接作为Tat的靶蛋白。TIP30和RNA聚合酶II结合不紧密，可用磷酸纤维素层析分离。TIP30的完整活性需要转译后的修饰或能够部分耗竭TIP30抗体的联合因子。TIP30不能增加缺乏Tat时的HIV的转录水平，因而是Tat所介导的转录反应和某一细胞催化剂所特定需要的。[HuaXiao，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998，95(5)：2146-51]

TIP30对于HIV-1基因编码的Tat调节蛋白的反式激活作用很重要，在生物体内活化转录作用，有效地控制各种基因的转录表达水平，若表达异常会导致转录停止或过度，而引起各种疾病。在生物体内与各种免疫系统疾病等密切相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71。

由于如上所述调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子TIP30-39.71异常相关的疾病的方法。