[发明专利]一种新的多肽——人CD40受体相关因子CRAF1－13.42和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人CD40受体相关因子CRAF1-13.42，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

CD40是一种I型穿膜糖蛋白，它属于TNF(肿瘤坏死因子，tumor necrosisfactor)受体超家族。除CD40外，这一超家族还包括11种其它蛋白，如TNF受体I和II，神经生长因子(NGF)受体和Fas。这一家族的成员的细胞外区域具有顺序相似性，它们都具有多个富含半胱氨酸的假重复。这个通常的细胞外结构框架在TNF受体超家族成员与平行的TNF相关细胞因子配基相作用时发挥重要作用。至今，已有八种这样的配基被克隆出来，包括TNF-α，CD40L和FasL，它们具有广泛的顺序同源性，它们作为分泌细胞因子或II型穿膜配基。

TNF受体超家族成员的功能相当广泛，有的为普通的敏感阶段反应，有的激活淋巴细胞，导致神经细胞生长。有些时候，它们处于相反的地位。如Fas和TNFαRI可以导致配基积累的衰亡，而CD40和NGF受体可把细胞从衰亡中释放出来。此外，无论TNFαRI，TNFαRII，还是CD40的积累都会激活核因子kappa B。CRAF1与TRAF1和TRAF2非常相似，它们属于信号转导蛋白家族(TRAF家族)，可能是TNF受体超家族的下游信号转导者。TNF受体家族和TRAF家族成员的直接结合是具有特异性的，TNF受体超家族成员的细胞质尾相当短，几乎或完全不具备顺序同源性。我们发现，CRAF1的COOH-末端片段与Fas和TNFαRII的尾部无作用。然而，TRAF家族成员可以形成同型二聚物或杂二聚物，这将导致它们的信号转导途径巨大分化和特异性。TRAF家族成员二聚化的平衡决定了细胞的衰亡和存活。

在B细胞的不同分化阶段，CD40信号系统具有不同的功能和影响。CD40的交连使休眠的B细胞进入细胞周期，增强一些慢性淋巴白血病B细胞的增殖率，诱导一些B淋巴细胞衰亡，防止初生中心的B细胞衰亡。CRAF1在B细胞的所有分化阶段都表达，且表达相当广泛。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人CD40受体相关因子CRAF1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人CD40受体相关因子CRAF1-13.42。

由于如上所述人CD40受体相关因子CRAF1-13.42蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人CD40受体相关因子CRAF1-13.42蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人CD40受体相关因子CRAF1-13.42蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人CD40受体相关因子CRAF1-13.42以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CD40受体相关因子CRAF1-13.42的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人CD40受体相关因子CRAF1-13.42的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人CD40受体相关因子CRAF1-13.42的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人CD40受体相关因子CRAF1-13.42的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人CD40受体相关因子CRAF1-13.42的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人CD40受体相关因子CRAF1-13.42异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。