[发明专利]一种新的多肽——人Alu－RNA结合蛋白13.75和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人Alu-RNA结合蛋白13.75，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

人类Alu序列是人类基因组的内生短的转座因子。这些因子已经累积到将近1百万个模板，在人类基因组中占了超过5％的比例。所有的Alu重复子都具有同源序列，并且被认为是从Alu-同源区域信号识别点的7SL RNA部分分化出来的。根据同源序列决定的进化相关性，可将Alu重复序列分为不同的亚科。[Ullu，E.，and A.M.Weiner.1984.EMBO J.3：3303-3310]在有些情况下，这些重复序列插入到普通基因组中可能引起遗传性疾病[Wallace，M.R.，Anderson，L.B.et al.，1991]或导致癌症的发生[Miki，Y.，Nishisho，I.et al.，1992]更有甚者，还发现有重复序列在一部分蛋白中表达[Makalowski，W.，Mitchell，G.A.，and Labuda，D.，1994]，并且在某些癌科细胞系中也有存在[Hohjoh，H.，andSinger，M.F.，1996]。

目前，通过迁移率变动分析法，我们分离出了人Alu-RNA结合蛋白(RBP)。结果表明人18KDa Alu-RNA结合蛋白和以前克隆的鼠14KDaSPR9/14蛋白的亚基高度同源。人类cDNA在3’编码区还包含了一个CAG三核苷酸而在鼠的序列中没有发现，这就说明了人类蛋白-RNA复合物在凝胶延迟定量分析中为什么会有较大的尺寸和较慢的迁移率，[Chang，D.-Y.，andR.J.Maraia.1993.J.Biol.Chem.268：6423-6428]由此证明了18KDa Alu-RNA结合蛋白是人类SPR14-等价蛋白，如果排除C末端，Alu-RNA结合蛋白和鼠SPR14都是110个残基。研究表明Alu-RNA结合蛋白定位在人染色体15q22，这种蛋白的特有结构将对Alu序列的进展有帮助。

组织表达研究发现，Alu-RNA结合蛋白能够在脑中大量表达，在肝和肺中表达水平适中，而在心脏中的表达水平非常低。Alu-RNA结合蛋白在哺乳动物中是较为保守的，而在哺乳动物以外的其他种类生物中没有存在。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人Alu-RNA结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人Alu-RNA结合蛋白13.75。

由于如上所述人Alu-RNA结合蛋白13.75蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人Alu-RNA结合蛋白13.75蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人Alu-RNA结合蛋白13.75蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人Alu-RNA结合蛋白13.75以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Alu-RNA结合蛋白13.75的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Alu-RNA结合蛋白13.75的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人Alu-RNA结合蛋白13.75的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人Alu-RNA结合蛋白13.75的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人Alu-RNA结合蛋白13.75的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人Alu-RNA结合蛋白13.75异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。