[发明专利]一种新的多肽——糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

许多真核细胞表面蛋白通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定到细胞膜表面。不论在原生动物还是在哺乳动物中，GPI的核心结构是保守的(Thomas，J.R.，Dwek，R.A.，and Rademacher，T.W.，1990；Cross，G.A.，1990)。许多蛋白如糖基转移酶等是GPI锚定器的生物合成所必不可少的，人类细胞中的糖基磷脂酰肌醇聚糖F(PIG-F)也是其中之一。

PIG-F的全长cDNA含有一个917碱基的开放阅读框，编码一条219个氨基酸残基的蛋白。PIG-F的5’非翻译区域含有一个典型的翻译起始一致性序列(Kozak，M.，1987)，但是其信号肽没有典型的N末端疏水性序列。根据PIG-F的氨基酸序列可以推断，该蛋白是非常疏水性的(包含了多于55％的疏水性残基)，因此其大多数氨基酸残基都包埋在细胞膜的内部。

由于其cDNA中没有任何的DNA结合区域发现，推断PIG-F可能直接参与GPI锚定器的生物合成过程，并且在七最后一个步骤中起作用。它还可能有乙醇胺磷酸酯(EthN-P)转移酶活性，能够催化乙醇胺磷酸酯向GPI中间态(存在三个甘露醇残基)的转移。另外，PIG-F还与烷化的磷脂酰肌醇(PI)的生物合成密切相关。

在人类造血细胞中，GPI锚定器生物合成的缺乏将导致一种溶血性疾病——阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)(Mahoney，J.F.，Urakaze，M.et al，1992；Takahashi，M.，Takeda，J.et al.，1993)。实验证明，参与GPI锚定器生物合成早期过程的糖基磷脂酰肌醇聚糖A(PIG-A)(Miyata，T.，Takeda，J.，etal.，1993)的缺失就是造成PNH疾病的原因之一。事实上，GPI锚定器生物合成过程中任何一个步骤的缺失都将导致PNH疾病的发生，PIG-F当然也不例外(Inoue N，Kinoshita T，Orii T，Takeda J，1993)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与糖基磷脂酰肌醇聚糖F的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21。

由于如上所述糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。 

本发明的另一个目的是提供含有编码糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与糖基磷脂酰肌醇聚糖F12.21异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。