[发明专利]一种新的多肽——人蛋白磷酸酶2Aalpha亚基22.66和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

蛋白酪氨酸磷酸化和去磷酸化是生物体内细胞信号传导的一个重要机制，通常由蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸/丝氨酸磷酸酶来共同调控完成。研究发现，生物体内存在着两类不同的蛋白酪氨酸磷酸酶：可溶性胞液酶和膜结合酶。这两种磷酸酶在生物体内具有相似的功能，只是作用的位点不同[Jones S.W.，EriksonR.L.et al.，1989，J Biol.Chem.，264：7747-7753]。蛋白酪氨酸激酶与蛋白酪氨酸磷酸酶在生物体内协同作用，蛋白酪氨酸激酶的失活将导致细胞信号传导途径的异常，即细胞的异常增殖与原癌基因的变形、恶化，而蛋白酪氨酸磷酸酶作为蛋白酪氨酸激酶的拮抗剂，是一种肿瘤抑制基因，抑制着该过程的进行。该磷酸酶的突变或失活将导致原癌基因的变形，即导致生物体内各种肿瘤及癌症等疾病的发生。

根据底物选择性，抑制物敏感性和对二价阳离子的依赖性可以将蛋白酪氨酸/丝氨酸磷酸酶分为几种：PP1，PP2A，PP2B，PP2C。其中以PP2A研究最为深入。报道表明PP2A在许多不同的细胞生命过程中都发挥着重要的调节作用，因此，对PP2A的调控也显得十分重要。现在已经知道的对PP2A的调控机制有两种：1、PP2A的催化亚基PP2Ac对PP2A的转录后调控。体外试验表明，近C端的酪氨酸磷酸化或者一个未定位的丝氨酸磷酸化会使催化活性降低。而C端的亮氨酸的羧甲基化使磷酸化酶的活性增高。2、PP2Ac与其他蛋白的共同作用调节PP2A的活性。

近来发现的蛋白磷酸酶2A alpha亚基主要在脑的神经核以及肝脏中表达，另外在睾丸中也有发现(J.Cell Sci.111，1331-1340)。还有证据表明蛋白磷酸酶2A alpha亚基对微管蛋白的中性化和稳定都起到一定的调节作用(J.CellSci.111，1331-1340)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人蛋白磷酸酶2A alpha亚基的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66。

由于如上所述人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人蛋白磷酸酶2A alpha亚基22.66异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。