[发明专利]一种新的多肽——脂肪细胞分化相关蛋白8.8和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——脂肪细胞分化相关蛋白8.8，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

脂肪细胞分化相关蛋白(ADRP)是脂肪细胞分化最早标志之一[Eisinger，D.P.and Serrero，G.(1993)Genomics 16，638-644]，主要由球状表面膜结构组成。该蛋白特异于三酰基甘油的合成和储存，为其最终运输到其他组织做准备。在脂肪细胞和哺乳动物的上皮细胞中，脂肪细胞分化相关蛋白将三酰基甘油存储在胞质溶胶的小滴中。哺乳动物细胞的脂肪细胞分化相关蛋白主要集中在与产生乳球脂蛋白有关的特异细胞成分。

脂肪细胞分化相关蛋白的疏水N末端以及与脂肪酸的共价连接似乎都特别适合该蛋白与脂滴的反应。实际上，疏水性肽段的十四烷酸化和十六烷酸化增加了自身分配进脂滴的机会[Joseph，M.and Nagaraj，R.(1995)J.Biol.Chem.270，19439-19445]。

脂肪细胞分化相关蛋白没有信号肽，并缺乏一个转膜序列，因此它只能通过与脂滴的结合而从细胞中分泌。在脂肪细胞和乳汁分泌细胞中，富含三酰基甘油的脂滴形成于内质网的膜表面上，并且在所有的细胞类型中它们的脂滴膜表面与内质网小叶是连续的[Zaczek，M.and Keenan，T.W.(1990)Protoplasma 159，179-182]。

脂肪细胞分化相关蛋白的另一个功能可能是充当一个调节分子，调节脂滴表面和顶端溶胶膜氧化酶包含内膜衣被丁酸甘油酯/黄嘌呤之间的反应[HansW.Held，Martina Schnolzer et al，(1996)Biochem，J.320(pt3)，1025-1030]。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与脂肪细胞分化相关蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为脂肪细胞分化相关蛋白8.8。

由于如上所述脂肪细胞分化相关蛋白8.8蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的脂肪细胞分化相关蛋白8.8蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新脂肪细胞分化相关蛋白8.8蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——脂肪细胞分化相关蛋白8.8以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码脂肪细胞分化相关蛋白8.8的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码脂肪细胞分化相关蛋白8.8的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产脂肪细胞分化相关蛋白8.8的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——脂肪细胞分化相关蛋白8.8的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——脂肪细胞分化相关蛋白8.8的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与脂肪细胞分化相关蛋白8.8异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中2032-2274位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2425位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。