[发明专利]抗人胃癌单链抗体及其应用

说明书

本发明涉及基因工程抗体，具体地说涉及一种抗人胃癌单链抗体及其应用。

胃癌是当今严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，多年来人们一直在寻找诊断和治疗胃癌的各种途径。随着肿瘤免疫学和分子生物学技术的不断发展。已有许多抗胃癌单克隆抗体及其单抗免疫偶联物应用于胃癌的显像、寻向治疗等研究方面的报道。但是，由于鼠源性单克隆抗体具有较强的免疫原性，给其临床应用带来困难。基因工程抗体的问世，特别是被誉为抗体技术革命性进展的噬菌体抗体库技术的出现，为克服单克隆抗体的缺陷提供了新途径。目前，抗胃癌基因工程抗体的研究还处于初始阶段，因此，获得多种抗胃癌抗体可变区基因及其抗体分子片段，对于抗胃癌基因工程抗体的研制和应用具有重要意义。

噬菌体抗体库技术无需经过杂交瘤技术，甚至无需经过免疫过程即可直接获得特异性的各种抗体基因及其抗体分子片段。单链抗体具有分子量小，能在保持其与抗体亲和活性的同时，降低免疫原性，对肿瘤有很强的穿透力等优势，是具有很好应用前景的一种基因工程抗体。因此，利用噬菌体抗体库技术，进一步研制更多、更好的抗胃癌基因工程抗体，无疑在胃癌的诊断和治疗中有重要价值。

本发明的目的在于利用噬菌体抗体库技术提供一种抗人胃癌单链抗体。

本发明的另一个目的是上述抗人胃癌单链抗体的应用。

本发明的抗人胃癌单链抗体是一种采用噬菌体抗体库技术，直接从胃癌细胞抗原免疫的小鼠脾细胞出发，构建的抗人胃癌全套单链抗体基因噬菌体抗体库中筛选出的具有抗胃癌活性的单链抗体，并可在大肠杆菌中进行可溶性表达。

本发明的抗人胃癌单链抗体，它由720个核苷酸组成，其核苷酸序列如下：

CAG GTC CAA CTG CAG CAG TCT AGG GCT GAA CTG GTG AAG CCT GGG GCT TCA GTG

AAA CTG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACC AGC TAT TGG ATG CAC TGG

GTG AAG CAG AGG CCT GGA CAA GGC CTT GAG TGG ATT GGA GAG ATT AAT CCT AGC

AAC GGT CGT ACT AAC TAC AAT GAG AAC TTC AAG AGC AAG GCC ACA CTG ACT GTT

GAC AAA TCC TCC AGC TCA GCC TAC ATG CAA CTC AGC AGC CTG ACA TCT GAG GAC

TCT GCG GTC TAT TAC TGT GCA AGA TAT GAG GAC TAC GAT CTC CAT GAC TAC TGG

GGC CAA GGG ACC TCG GTC ACC GTC TCC TCA GGT GGA GGC GGT TCA GGC GGA GGT

GGC TCT GGC GGT GGC GGA TCG GAC ATC AAG CTC ACT CAG TCT CCA ACC GCC ATG

GCT GCA TCT CCC GGG GAG AAG ATC ACT ATC ACC TGC AGT GCC AGT CAG ACA TAC

AAC TTA GTA ATG TGG TAC CAA CAG AAG TCA GGG ACC TCT CCT AAA CCC TGG ATT

TAT AGG ACA TCC AAT CTG GCT TCT GGA GTC CCA GCT CGC TTC AGT GGC AGT GGG

TCT GGG ACT TCT TAC TCT CTC ACA ATT GGC ACC ATG GAA GCT GAA GAT GTT GCC

ACT TAC TAC TGC CAG CAG AGT AGT ACT TTA CCA TTC ACG TTC GGC TCG GGG ACA

AAG TTG GAA ATA AAA CCG

本发明的抗人胃癌单链抗体，其中重链可变区基因VHCI由354个核苷酸组成，其核苷酸序列如下：

CAG GTC CAA CTG CAG CAG TCT AGG GCT GAA CTG GTG AAG CCT GGG GCT TCA GTG

AAA CTG TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACC AGC TAT TGG ATG CAC TGG