[发明专利]羊胎多肽核酸营养液的制备方法

说明书

本发明涉及一种以羊胎为原料，富多肽核酸的营养液的制备方法。

人和动物的胎盘为传统中药，含有多种具有免疫调节作用的生物活性物质，并富蛋白质、多肽、氨基酸及核酸。胎儿是一个完整的生命，除含有丰富的蛋白质、多肽、氨基酸及核酸外，还含有大量的卵磷质、不饱和脂肪酸、多种维生素和多种微量元素，更重要的是动物胚胎中含有大量的生物活性物质，对生物的生长发育、免疫调节、新陈代谢有十分重要的作用，并且胎儿中的营养物质和生物活性物质有易吸收、利用率高的优点。

在动物制品中，有些注重其生物活性，而只透析获得具有免疫活性胎盘肽，而没有利用胎盘中极为丰富的营养物质。较多的是采用高温灭菌后再提取营养成份，传统中医也是煮后用药，因而致使部分营养成分(如蛋白质、维生素等)的高温破坏和生物活性物质活性丧失。虽然有全胎盘低温冷冻干燥制品的出现，使生物活性物质和营养成分得以保留，但其吸收率和利用率不高，并且只能用于口服，而不能做成注射针剂和化妆品。同时，多数胎盘制品忽略了胎盘及胎儿中营养极高的核酸资源。    

本发明的目的在于提供一种羊胎多肽核酸营养液的制备方法。它既能有效提取并保存胎盘中的生物活性物质，又能充分提取胎盘中营养丰富的蛋白质和核酸等营养物质。主要解决已有技术对有效组份和营养成份的提取不完全、损失多、吸收率少等缺点。同时，提供一种多肽基因滋补品及免疫制剂。

本发明的目的可以通过以下技术来实现：

营养液包括胎盘透析液、蛋白质水解液和核酸制备工艺流程如下：包括生物活性物质的抽提和蛋白质水解及核酸抽提三大步骤。

1、活性物质的抽提。

(1)原料处理：取1～3个月羊全胎盘(包括胎儿和胎盘)在-20℃～-40℃迅速冷冻、洗净、清理并去除结缔组织和脐带。

(2)碎胎盘组织：将组织剪成小块，在匀浆器中匀浆，于-60℃～-80℃速冻，之后于15℃～30℃融化，反复冻融。

(3)活性物质的制备：将上述冻融产物离心，取上述清液经透析或超滤，再用微孔滤膜过滤除菌即得含有丰富的生物活性物质胎盘转移因子。

2、蛋白水解液的制备，取上述离心所得的沉淀部分，采用酶-酸联合水解。

(1)酶水解，取沉淀加蒸馏水，煮沸消毒，无菌条件下调PH至7～8加胰酶，温度控制在36℃～42℃，酶解。

(2)上述水解物，加温煮沸后，调PH至3±0.5，高温高压水解，之后调PH值至6+0.5抽滤除去沉淀，收集清液即蛋白质水解液，其中含有各种大小的肽段及各种核酸。

3、进一步抽提核酸：

(1)在上述抽滤的沉淀中加入蒸馏水，充分混均，采用超声处理仪对剩余的基因组DNA进行剪切，50℃±5℃孵育，过滤去除残渣及油脂。

(2)饱和酚抽提，加同体积的饱和酚，混匀，离心分离。

(3)上述所得吸入另一干净窗口中，即得核酸溶液。

以上各提取液于低温储存待用。

本发明与现有技术相比具有的优点和积极效果：

1、获得的胎盘制剂，保留了胎盘中96％的天然活性成份。其中有与人体健康极为密切的SOD(见表1)

2、酶-酸联合水解方法，大幅度提高了氨基酸、短肽等物质的含量，并且其中所含丰富的小分子营养物易被人体吸收。而且8种必需氨基酸占总量的百分比为42.48％(见表2)。并含有丰富的微量元素(见表3)。

3、本发获得的胎盘制剂，含有丰富的极利于吸收的核苷酸、各种大小核酸片段等核酸营养物质，是一种较好的基因营养保健品。(见表1)

4、此方法科学合理，全部原料为天然物质，来源广泛，流程短，操作简单，适合于工业化生产，有较好的应用开发前景。

表1营养液的性质及主要成份

   项目    含量

   性状    棕色透明液体

PH值          6.8    

密度          1.21g/cm³

氨基酸        33.68mg/ml

蛋白质        27mg/ml

超氧化物歧化酶639u/ml

核酸          1.63mg/ml

(1)用邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活力。

(2)定磷法测定核酸含量。

(3)蛋白质及多肽浓度测定采用：Lowry法。

表2营养液各种氨基酸含量(mg/ml)

氨基酸    量      氨基酸    量