[发明专利]一种新的多肽——人组织阴离子转运多肽8.91和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人组织阴离子转运多肽8.91，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

肝细胞能够通过肝基底外侧细胞从肝窦状血小管摄取大量不同的亲脂性组织阴离子如多种胆汁阴离子与甾族复合物，钠离子依赖性与非钠离子依赖性的转运系统位于肝基底外侧细胞质膜区域上，与牛磺酸(或甘氨酸)结合的胆酸通过钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(NTCP)优先地被肝细胞摄取，这在鼠与人肝细胞中均发现(Hagenbuch B et al.，1991)。另一方面，肝细胞对非胆酸结合状态的组织阴离子的摄取是通过非钠离子依赖性的载体独特性地进行，这些载体可能包括胆汁转运激酶(37KD)、四溴酚酞磺酸钠和胆红素结合蛋白(55KD)、一种特殊的组织阴离子结合蛋白(55KD)(Tiribelli C.，1990；Berk PD etal.，1987；Wolkoff AW et al.，1993)，此外已被克隆的鼠与人肝组织阴离子转运多肽74亦进行非钠离子依赖性的组织阴离子如四溴酚酞磺酸盐、胆酸盐、牛磺胆酸盐、甘氨胆酸盐、脱氧牛磺胆酸盐等的转运(Jacquemin E et al.，1994)。

人肝组织阴离子转运多肽(OATP)74基因由27110个核苷酸组成，含16个碱基对的聚腺苷酸尾，它的起始位点在第54个核苷酸处，其开放读框序列延伸超过2010个核苷酸，编码一个含670个氨基酸分子量为74KD的含8个潜在N-糖基化位点的蛋白。人肝组织阴离子转运多肽74的序列提示蛋白含有10-12个跨膜区域、8个N-糖基化位点，其中的4个N-糖基化位点位于跨膜结构域9-12的大的亲水噜噗上(Kullak-Ublick et al.1995)。人肝组织阴离子转运多肽74与鼠组织阴离子转运多肽74非常密切，两者有67％的同源性、82％的相似性，鼠组织阴离子转运多肽74可能含有10个跨膜结构域、4个N-糖基化位点(JacqueminE et al.，1994)，两者很可能均属组织阴离子转运多肽基因家族(Kullak-Ublicket al.1995)。

以人肝OATP互补RNA为探针，Northern杂交分析显示来自人肝脏、脑、肺、肾、睾丸的mRNA的交叉激活。进一步的研究显示高强度的杂交信号在人脑全mRNA、肝脏mRNA、肾mRNA中出现，并且一些数据提示人OATP在许多组织中以多种形式出现，主要表现为分子量的大小。人OATP在人体总的组织阴离子转运上起着重要作用。人肝OATP在肝外多种组织的存在暗示了总体上它在人体组织的阴离子跨上皮运输中的重要作用(Kullak-Ublick et al.，1995)。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人组织阴离子转运多肽的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人组织阴离子转运多肽8.91。

由于如上所述人组织阴离子转运多肽8.91蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人组织阴离子转运多肽8.91蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人组织阴离子转运多肽8.91蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人组织阴离子转运多肽8.91以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽8.91的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽8.91的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人组织阴离子转运多肽8.91的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人组织阴离子转运多肽8.91的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人组织阴离子转运多肽8.91的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人组织阴离子转运多肽8.91异常相关的疾病的方法。