[发明专利]一种新的多肽——人膜结合蛋白11.99和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人膜结合蛋白11.99，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

这类调节。其中一类蛋白随刺激信号不同而改变其与细胞膜的结合状态，由此引发各种次级通路。钙离子依赖型膜结合蛋白就是这样一类蛋白。现在已经较详细地研究了调控钙离子与膜磷脂相互作用的两种蛋白结构，附加折叠结构和C2结构。

C2结构没有明显的催化活性。其与膜的相互作用可以引起其他膜结合蛋白如磷脂酶的调制。它还有一种“二价”活性，即：它可以将两个膜结构相互连接而形成一个复合物，在另外的刺激信号的作用下这两个膜结构可以融合在一起。

现在已经发现了几种蛋白具有C2结构，例如：蛋白激酶C，synaptotagmin，rabphilin，Doc2，Munc13，以及最新发现的Copines。Copines蛋白包括两个C2结构，相当保守，在植物，动物和纤毛虫中都有发现，说明其在真核细胞中起重要作用。体外实验中，Copines蛋白在钙离子存在条件下会发生自聚集现象，也可与富含磷脂酰丝氨酸的小泡结合。这一现象是钙离子特异的。Copines蛋白也有C2结构的“二价”特性，可以将两个膜结构结合在一起。Copines蛋白可能还与细胞膜物质运输有关。在脑中发现的Copines蛋白根据胞质中的钙离子的浓度调节中枢神经系统神经突触的可塑性。

Copines蛋白表达失常会引起膜表面物质运输紊乱，使细胞营养供应不正常，以及代谢废物排出细胞发生阻碍，从而引起营养不良、组织坏死、局部浮肿等症；该蛋白在分泌细胞中表达失常还会引起激素等分泌物质不能及时分泌至胞外而导致各种内分泌紊乱等症；在中枢神经系统中该蛋白表达失常会扰乱神经突触感受神经冲动的功能，引起一系列。同时，在中枢神经系统中Copines蛋白表达失常会破坏神经突触的可塑性，从而导致记忆力下降。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人膜结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人膜结合蛋白11.99。

由于如上所述人膜结合蛋白11.99蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人膜结合蛋白11.99蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人膜结合蛋白11.99蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人膜结合蛋白11.99以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人膜结合蛋白11.99的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人膜结合蛋白11.99的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人膜结合蛋白11.99的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人膜结合蛋白11.99的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人膜结合蛋白11.99的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人膜结合蛋白11.99异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中312-641位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1494位的序列。