[发明专利]血清β2－糖蛋白I作为促溶栓活性物质的应用及其功能肽段

说明书

本发明涉及血清β₂-糖蛋白I作为促溶栓活性物质的应用及其功能肽段。

心血管病被称为是威胁人类健康与生命的第二杀手，血栓的产生与发展既是心血管疾病发生的重要环节，又是造成中风，心肌梗塞的直接原因。溶栓药物的开发研究一直在心血管疾病防治的研究中处于重中之重的位置，而且在相当长时期内都将是生物工程研究与产品开发的重点。

机体存在着凝血与纤溶(使凝血块溶解)两个对立与统一的系统，维持和调节两者间的平衡，保证血液循环的畅通。基于机体具有的这种凝血与纤溶机制，人们研究与开发防止血栓形成和溶(血)栓方法和药物。目前国内外最广泛使用的有效的溶栓生物制品有组织纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)，尿激酶(uPA)，链激酶等，它们都是基于这样的机制：血液中不具活性的血纤维蛋白溶酶原(plasminogen)在其激活因子(tPA，uPA)的作用下转变为具有活性的血纤维蛋白酶(plasmin)，后者能够溶解由血纤维蛋白形成的凝血块[1.Machovich，R.，Litwiller，R.D.and Owen，W.G.(1992)Biochemistry.31，11558-11561；2.Hoylaerts，M.，Rijken，D.C.，Lijnen，HR.and Collen，D.(1982)J.Biol.Chem.257，2912-2919.]。但是，现有上述溶栓药物普遍存在药效持续时间短，给药量小时疗效不佳，而大剂量使用又会损伤机体凝血机制的缺点。

事实上，在体外实验中，如果没有某些辅助因素(cofactors)存在，血纤维蛋白溶酶原-tPA/uPA纤溶体系(plasminogen-tPA/uPA fibrinolysis system)的纤溶活性很低。因此，在机体内应该存在有促进或激活纤溶体系的活性物质。目前发现的相关辅助因素或因子有三类：形成血凝块的纤维蛋白本身(fibrin)，某些细胞膜表面受体聚合体(如annexin II complex)，某些高温等激烈处理产生的不可逆变性蛋白[1.Machovich，R.and Owen，W.G.(1997)Arch.Biochem.Biophy.344，343-349；2.Ellis，V.(1997)TCM，7(7)，227-234.]。然而，它们都不是天然的可溶性血清活性因子，与人体的亲和和相容性均存在着问题，显然不宜开发为临床应用的促溶(血)栓活性物质药物。

本发明的目的是提供血清β₂-糖蛋白I作为促溶栓活性物质的应用。

本发明的另一个目的是提供上述血清β₂-糖蛋白I作为促溶栓活性物质的功能肽段。

血清β₂-糖蛋白I可以作为促溶栓活性物质而得到广泛应用，特别是应用于制造各类的溶栓药物。

血清β₂-糖蛋白I与磷脂的复合物或载有血清β₂-糖蛋白I的脂质体、与组织纤维蛋白溶酶原激活剂或尿激酶结合的复合物以及该复合物进一步与磷脂结合的复合物，均具有溶栓的作用，可以利用其作为活性成分，生产具有溶栓功能的药物。

血清β₂-糖蛋白I作为促溶栓活性物质的功能肽段为：Gly¹-Pro⁶²，其主要作用肽段为Ser³⁸-Arg-Gly-Gly-Met-Arg-Lys⁴⁴和Cys⁴⁷-Pro-Leu-Thr-Gly-Leu-Typ-Pro-Ilu-Asn-Thr-Leu-Lys-Cys⁶⁰。利用该肽段可以生产具有溶栓功能的药物。

血清β₂-糖蛋白I作为促溶栓活性物质的结构域V的功能肽段为：Cys²⁷⁰-Ala³²⁰，其主要作用肽段为Cys²⁸¹-Lys-Asn-Lys-Glu-Lys-Lys-Cys²⁸⁸和Lys³⁰⁵-Cys-Phe-Lys-Glu-His-Ser-Ser-Leu-Ala-Phe-Trp-Lys-Thr-Asp-Ala³²⁰。利用该肽段也可以生产具有溶栓功能的药物。