[发明专利]一种新的多肽——人半胱氨酸蛋白水解酶10.89和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人半胱氨酸蛋白水解酶10.89，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

序性死亡是生物体细胞代谢生长的一种正常的生理现象，是生物体内各组织器官正常生长发育的一种重要的自我调控过程。细胞主动发生的自然死亡过程，是平衡细胞增殖，调节机体细胞数量恒定的一种重要方式。其在生物体内主动清除多余的特异性或分化能力与机体不相适应的及已完成功能而又不再应用的细胞。该调控过程的失败或异常通常将导致机体疾病、畸形甚至死亡。细胞程序性死亡通常由多种蛋白协同作用完成，人们已从多种生物体内克隆得到了多种不同的细胞程序性死亡相关的蛋白家族，如半胱氨酸蛋白水解酶家族等。

近年，人们已克隆得到多种半胱氨酸蛋白水解酶家族的成员，如哺乳动物Ice蛋白、Ich-1(Nedd2)蛋白、Cpp32(Mch1)蛋白及线虫的Ced-3蛋白等，所有该蛋白水解酶家族的成员均在生物体内作为细胞程序性死亡调节子，调控着细胞的正常增殖与死亡。这些蛋白均具有极为相似的结构特征，其蛋白序列中均含有一高度保守的活性位点：QACRG；该活性位点是蛋白与底物结合，并发挥其生物学活性的重要活性中心。

最近，人们又从人中克隆得到了一新的半胱氨酸蛋白水解酶家族的成员Mch2。研究发现，该蛋白在生物体内有两种不同的类型Mch2α及其非活性异构体Mch2β，该两个蛋白的氨基酸序列中亦含有如上所述的保守的活性位点，它们在生物体内亦参与调控多种细胞及组织的正常发育及生长。由上可知，细胞程序性死亡是生物体组织正常发育及生长所必需的，其促使体内各组织细胞平衡增殖，是调节机体细胞数量恒定的一种重要方式。该蛋白的突变或表达异常将直接影响体内相关调控机制的异常，进而引发各种相关的疾病。该蛋白通常与生物体内多种疾病，包括相关组织的肿瘤及癌症、神经退化性疾病(如帕金森综合症、老年痴呆症)等的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人半胱氨酸蛋白水解酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人半胱氨酸蛋白水解酶10.89。

由于如上所述人半胱氨酸蛋白水解酶10.89蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人半胱氨酸蛋白水解酶10.89蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人半胱氨酸蛋白水解酶10.89蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人半胱氨酸蛋白水解酶10.89以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人半胱氨酸蛋白水解酶10.89的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人半胱氨酸蛋白水解酶10.89的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人半胱氨酸蛋白水解酶10.89的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人半胱氨酸蛋白水解酶10.89的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人半胱氨酸蛋白水解酶10.89的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人半胱氨酸蛋白水解酶10.89异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中20-319位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-199位的序列。