[发明专利]一种新的多肽——细胞色素b559－34.43和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——细胞色素b559-34.43，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

绿色植物或某些细菌通过光合作用利用阳光中的能量并生成食物。通过利用氢还原特定的化学复合物，利用氧生成氧气从而积聚阳光，分裂水分子。通过光驱动光合作用机制还原化学复合物被称为“光反应”；利用这些被还原的化合物固定CO2于食物中被称为“暗反应”。光反应及暗反应不是单一的步骤，它包括一系列复杂的反应，每一步反应涉及电子传递。光反应被分为两种“光系统”，光合作用的电子传递就是在这两个不同的光系统中进行。光系统II(PSII)包括分裂水分子释放出氧气的反应，是一种存在于绿色植物或是蓝细菌类囊体膜中的多亚基色素-蛋白质复合体，由200天线叶绿素，50类胡萝卜素，一个P680作用中心，一个原初电子供体(Z)，一个原初电子受体(Q)，4个质体醌，6个锰原子，2个细胞色素559构成。光系统II需要680nm短波的光，它产生一种强的氧化剂和一种弱的还原剂，前者导致O2的形成。弱氧化剂和弱还原剂相互作用而产生ATP。

PSII中含有作为一种膜整合蛋白的细胞色素b559(cyt b559)。Cyt b559有两个亚基，α(由基因psbE编码)及β(由基因psbF编码)亚基，每个亚基具有一个跨膜的α-螺旋区域，其同源性约60％。α及β亚基形成一个异二聚体，并且血红素辅因子在该处与两个亚基配位。如同其他的b型细胞色素，cyt b559的轴配体是两个组氨酸残基，每一个亚基有一个位于跨膜区域的组氨酸残基，这两个组氨酸残基在细胞色素b559中与血红素铁配位。两个亚基血红素结合残基的周围区域十分相近，可被作为一个特征序列模式：[LIV]-x-[ST]-[LIVF]-R-[FYW]-x(2)-[IV]-H-[STGA]-[LIV]-[STGA]-[IV]-P，其中H是血红素铁配体。细胞色素b559在稳固功能性PSII复合体中起重要作用。细胞色素b559是唯一已知通过血红素铁以及组氨酸氮之间的配体结合不同的亚基的膜结合多亚基细胞色素。因而，如果该细胞色素具有异二聚体结构，甚至丧失两个轴配体中的一个就会严重破坏蛋白结构稳定性。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与细胞色素b559的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为细胞色素b559-34.43。

由于如上所述细胞色素b559-34.43蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的细胞色素b559-34.43蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新细胞色素b559-34.43蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——细胞色素b559-34.43以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码细胞色素b559-34.43的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码细胞色素b559-34.43的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产细胞色素b559-34.43的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——细胞色素b559-34.43的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——细胞色素b559-34.43的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与细胞色素b559-34.43异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。