[发明专利]一种新的多肽——组蛋白乙酰转移酶21.67和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——组蛋白乙酰转移酶21.67，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

组蛋白乙酰转移酶超家族根据不同的底物有许多成员，其中胆碱O-乙酰转移酶(ChoAcTase)，肉毒碱O-乙酰转移酶(COT)，过氧化物酶体肉毒碱辛酰转移酶(PCOT)，线粒体肉毒碱棕榈酰转移酶等由于序列的相似性成为一家族成员。其多处相似序列区域中最显著的两处为：一，近氨基末端存在三个[LIVM]-P二肽。二，序列中段有一系列带电氨基酸残基，组氨酸很可能为催化中心。

胆碱O-乙酰转移酶(ChoAcTase)参与神经递质乙酰胆碱的生物合成，与某些胆碱神经系统疾病有关，如Alzheimer病。研究发现猪和果蝇的ChoAcTase的cDNA只有30％的同源性，经插间隔，可达70％。猪序列中有六个高保守区域：22-80，125-181，241-285，292-344，369-430，545-605，其中有六个丝/苏氨酸磷酸化位点，292-344为组氨酸所在。几种不同种哺乳动物的ChoAcTase具有共同的功能，而结构很不相似，其mRNA的长度也有很大差异。

肉毒碱O-乙酰转移酶(COT)有三个成员：肉毒碱乙酰转移酶(CAT)，肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT)和肉毒碱辛酰转移酶(COT)，相互间的结构，免疫原性和催化底物都不同，而共同的motif：LPXLPXPXL不存在于其他任何乙酰转移酶成员，为肉毒碱结合位点。CAT存在于线粒体和过氧化物酶体中，底物为短链乙酰基团(C2-C4)，维持自由CoA和acety-CoA的相对平衡，广泛存在于酵母和哺乳类的各种细胞中，其中棕色脂肪和心脏肌细胞中的含量最高；CPT只存在于线粒体中，主要作用于中、长链乙酰基团(C2-C4)，促使胞浆长链脂肪乙酰辅酶A从线粒体内膜到β氧化场所的转运；COT只存在于过氧化物酶体中，优先底物为己酰辅酶A(hexanoyl-CoAs)，催化中链脂肪酸脱离乙酰辅酶A至肉毒碱，在中链乙酰辅酶A从过氧化物酶体到线粒体的运输过程中起作用。肉毒碱乙酰转移酶参与外源脂肪酸的代谢，其在代谢上的重要意义的最好的证明是：共济失调脑病患者的CAT明显减少。由于胆碱O-乙酰转移酶(ChoAcTase)在神经递质乙酰胆碱的生物合成，与某些胆碱神经系统疾病有关，如Alzheimer病；肉毒碱乙酰转移酶参与外源脂肪酸的代谢，共济失调脑病患者的CAT明显减少，该基因的研究开发可应用于脂肪代谢疾病和相关的脑神经病变。

两处相似序列区域中最显著的两处为：

一，近氨基末端存在三个[LIVM]-P二肽，保守序列为：[LI]-P-x-[LVP]-P-[IVTA]-P-x[LIVM]-x[DENQAS]-[ST]-[LIVM]-x(2)-[LY]。

二，序列中段有一系列带电氨基酸残基，组氨酸很可能为催化中心：R-[FYW]-x-[DA]-[KA]-x(0，1)-[LIVMFY]-x-[LIVMFY](2)-x-(3)-[DNS]-[GSA]-x(6)-[DE]-[HS]-x(3)-[DE]-[GA]。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与组蛋白乙酰转移酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为组蛋白乙酰转移酶21.67。

由于如上所述组蛋白乙酰转移酶21.67蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的组蛋白乙酰转移酶21.67蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新组蛋白乙酰转移酶21.67蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——组蛋白乙酰转移酶21.67以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码组蛋白乙酰转移酶21.67的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码组蛋白乙酰转移酶21.67的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产组蛋白乙酰转移酶21.67的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——组蛋白乙酰转移酶21.67的抗体。