[发明专利]电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶,其制法以及使用该凝胶的电泳法

权利要求书

1、一种电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶，在该用于电泳法的预制凝胶中，含有的电泳用缓冲液是其组成为含三(羟甲基)氨基甲烷及两性电解质的水溶液，其特征是，

(1)三(羟甲基)氨基甲烷的浓度为0.07mol/l～0.2mol/l，

(2)两性电解质由甘氨酸和1种以上的共存两性电解质所构成，

   (a)上述共存两性电解质的碱基解离常数范围为8.3＜pKb＜9.6

   (b)上述共存两性电解质的添加量，相对于上述甘氨酸为0.1～

      30％(摩尔)，

   (c)上述共存两性电解质和上述甘氨酸的总浓度为0.1～

      0.3mol/l，以及，

(3)采用pH6.0～6.8范围的缓冲液进行配制。

2、如权利要求1所述的电泳用聚丙烯酰胺预制凝胶，其特征是，上述共存两性电解质的分子内具有同样数目的阴离子性基团和阳离子性基团。

3、如权利要求1或2所述的电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶，其特征是，上述共存两性电解质为丝氨酸、谷氨酰胺、色氨酸，消旋蛋氨酸以及苯丙胺酸中的任何一种。

4、一种电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶使用方法，其特征是，采用权利要求1～3中记载的电泳用预制凝胶和含有三(羟甲基)氨基甲烷及甘氨酸的电泳缓冲液，进行蛋白质的分离分析。

5、一种电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶的制造方法，其把丙烯酰胺、多官能团交联剂、水以及下述(1)及(2)组成的缓冲液构成的混合物，在pH6.0～6.8的条件下，在聚合引发剂存在下进行聚合，

(1)三(羟甲基)氨基甲烷的浓度为0.07mol/l～0.1mol/l，以及

(2)两性电解质是由甘氨酸和1种以上的共存两性电解质所构成，

   (a)上述共存两性电解质的碱基解离常数为8.3＜pKb＜9.6，

   (b)上述共存两性电解质的添加量，相对于上述甘氨酸为0.1～

      30％(摩尔)，以及

   (c)上述共存两性电解质和上述甘氨酸的总浓度为0.1～30％

      (摩尔)。

6、一种电泳用的聚丙烯酰胺预制凝胶的使用方法，采用含有十二烷基硫酸盐的三(羟甲基)氨基甲烷以及甘氨酸的电泳用缓冲液，进行蛋白质的分离分析。

7、一种DNA的电泳法，其中，采用具有下述(1)及下述(2)特征的聚丙烯酰胺预制凝胶和含有三(羟甲基)氨基甲烷的电泳用缓冲液，

(1)在上述聚丙烯酰胺预制凝胶中所含的凝胶缓冲液，含有三(羟甲基)氨基甲烷、甘氨酸作为必须的一种以上的两性电解质以及一元酸，pH调至6.0～7.5，以及

(2)上述凝胶缓冲液中所含的上述两性电解质，是含有碱基解离常数为8.3＜pKb＜9.6的分子内具有同等数目的阳离子性基团和阴离子性基团的氨基酸。

8、如权利要求7所述的DNA电泳法，其中，上述凝胶缓冲液，至少含有一种作为上述一元酸的盐酸以及醋酸，把作为长期保存稳定性目的的pH调节至6.0～6.5。

9、如权利要求7所述的DNA电泳法，其中，上述凝胶缓冲液，至少含有一种作为上述一元酸的盐酸以及醋酸，把作为长期保存稳定性目的的pH调节至6.5-7.5。

10、如权利要求7所述的DNA电泳法，其中，上述电泳用的缓冲液，除三(羟甲基)氨基甲烷以外，还含有下述(1)及下述(2)，pH调至7.8～8.3。

(1)醋酸、磷酸及硼酸中的任何一种，以及

(2)作为螯合剂的乙二胺四醋酸二钠。

11、如利要求7或10所述的DNA电泳法，其中，上述电泳用的缓冲液含有作为上述一元酸的硼酸。

12、如权利要求7、10及11中任何一项所述的DNA电泳法，其中，上述电泳用的缓冲液，除含有三(羟甲基)氨基甲烷以外，还含有两性电解质，pH调至7.8～8.3。

13、如权利要求7、10、11及12中任何一项所述的DNA电泳法，其中，上述电泳用的缓冲液中含有的上述两性电解法为甘氨酸。

14、如权利要求7、10、11及12中任何一项所述的DNA电泳法，其中，上述电泳用缓冲液中含有的上述两性电解质是甘氨酸，而上述电泳用的缓冲液还含有十二烷基硫酸盐。