[发明专利]聚丙烯酰胺凝胶在哺乳动物的器官组织中形成胶囊的应用、培养细胞的方法和治疗肿瘤和糖尿病的方法

说明书

本发明涉及医学尤其是免疫学和肿瘤免疫学，也涉及糖尿病主要是胰岛素依赖型糖尿病的治疗。更具体而言，本发明涉及肿瘤细胞疫苗和肿瘤疫苗疗法的难题，和涉及治疗糖尿病的新方法。另外，本发明提供治疗方法所用的特殊胶囊，正是由于所述胶囊的使用才使得治疗更为有效。

已知哺乳动物器官、组织、细胞培养物的移植问题涉及与异体体外组织-和-细胞物质在受体器官中“生根”的可能性有关的难题。现存的自体、异源和异体移植方法，需要对受体进行强有力的免疫抑制治疗或者需要原始操作(original procedure)。后者包括移植人和动物胎儿的各种器官细胞的方法，即使用未发育种属特异性的作用。例如，以这种方式，将24-26周龄人胎儿胰腺的胰岛细胞培养物移植入试验大鼠的肝实质或者门静脉中。

引入细胞的部位可以是脾髓或者腹前壁肌肉。用类似方法治疗糖尿病患者的病例是已知的((Skaletskii N.N.，“胰腺的培养胰岛细胞对其在异体体外移植受体器官中存活性的影响”，公开在全俄罗斯器官移植大会(All-Russian Conference on Transplantation of Organs)1995，第219-220页(俄文)))。

将莱迪希氏细胞移植入男性的睾丸组织用于治疗有关的不育症，由于血睾屏障的存在，未出现排斥反应(Zybin D.V，“使用移植技术治疗男性球机能障碍患者的方法”，1995年1月20日的RF专利2026643)。

作为前述两种方法的结果，在保存移植细胞活力方面均获得了良好效果。然而，第一种方法只能单独使用胚胎细胞成为，这方面显而易见的原因是涉及重重困难；第二种细胞治疗方法仅能用于男性个体。

已知有借助于肝细胞的肿瘤疫苗和肿瘤疫苗疗法的方法。所用细胞是杂交瘤细胞或者同种异体或自体移植细胞。这些细胞的缺点是在器官中存在时间短，和相应地，具有低的致免疫作用(B.E.Souberbielle，M.Westby，S.Ganz.，和J.Kayaga，在B-16 F10黑素瘤模型中肿瘤疫苗四种方案的比较，基因治疗(Gene Therapy)1998，1447-1454)。

使用微囊将胰腺的胰岛(PIs)进行移植的方法为本领域技术人员所已知。

该方法包括：引入PIs(自体或者异体)包封到藻酸盐凝胶球中。将此类球植入腹膜内。在175天的期限内，球的植入完全取代了胰岛素治疗，但是该病例同时使用了免疫抑制治疗。将小牛PIs施用于大鼠，糖尿病减轻而不使用免疫抑制。血糖量在数周至1个月保持正常。

该方法一个确定的不便之处是必需使用免疫抑制治疗。具体困难涉及在体外制备胶囊(Lanza R.P.，Esker D.M.，和Marsh J.P.，在糖尿病性啮齿动物和犬中使用微囊移植胰岛的研究，现代医学杂志(J.Mol，Med.)，1999年1月77(1)：206-10)。

借助于肝细胞的肿瘤疫苗和肿瘤疫苗疗法的方法也是已知的。该方法包括生产肿瘤细胞和自体树状细胞(或巨噬细胞)的杂交瘤。得到的杂交瘤用作疫苗制剂。

然而，该方法也具有致免疫效力低的特征，因为引入的细胞在受体的器官中存在时间短(Gajewsky T.F.和Fallarino F.，黑素瘤肿瘤抗原-特异性免疫的合理进展(Rational development of tumor antigen-specific immunization in melanoma.)治疗免疫学(TherapeuticImmunology)1997，2，211-225)。

因此，现今本领域的问题是增加移植细胞寿命从而增强致免疫效力以及免除免疫抑制治疗的需要。

本领域专家清楚地知道：治疗糖尿病的问题也与正面解决移植细胞的问题密切相关，这个问题的成功解决将在许多方面有利于糖尿病治疗方法产生所需的效果。

举例来说，有一个治疗糖尿病的方法是已知的，据此方法进成人良性胰岛瘤细胞的植入，含有胰腺β-细胞的材料植入到腹直肌中(RF专利2004247)。

可是，当使用β-细胞培养物用于移植时，需要对抗成纤维细胞优势增长，并需要精确控制胰岛素瘤细胞培养物特定部分所产生的胰岛素量的必要性，这是由于可能将功能活性差异相当大的肿瘤细胞用作移植物的缘故，所述问题的存在为该方法的广泛应用设置了障碍。