[发明专利]T－细胞受体r可变阅读框架蛋白(TARP)及其应用

说明书

相关申请的引用

本申请要求1999年7月13日申请的US临时申请No.60/143,560，以及1999年10月1日申请的US临时申请No.60/157,471的优先权。此两个申请的内容通过引用在此引入本文。

关于联邦资助研究和发展的发明的权利的声明

是不适用的。发明背景

本发明涉及分子生物学以及医学诊断学和治疗学领域。前列腺癌是人类最普遍的一种癌症，是导致人的因癌症死亡的第三大原因。此种疾病的早期检测和治疗的方法将降低前列腺癌患者的死亡率。由恶性肿瘤细胞表达而其它细胞很少表达的肿瘤相关蛋白，可被用作靶来用于检测和干预。几种与前列腺癌相关的蛋白已被鉴定，包括前列腺特异性抗原(PSA)。

免疫疗法是一种用于抵抗癌症的有效的新武器。免疫疗法包括基于其靶抗原的产生来激发抵抗癌细胞的免疫应答。当使用人抵抗癌细胞的免疫应答时，优选用于激发细胞介导的抵抗癌细胞的免疫应答。基于细胞介导的免疫应答的免疫疗法包括对产生特定的表位的细胞产生细胞介导的应答。癌细胞产生不同的可成为免疫治疗的靶的蛋白。某些癌产生新的蛋白，例如作为突变的结果，它们是免疫原性的。然而，研究者们也发现肿瘤浸润淋巴细胞可特异性地识别癌细胞的未突变蛋白。例如，Rosenberg等人已发现肿瘤浸润淋巴细胞靶向和识别正常黑素瘤细胞和恶性黑素瘤细胞均产生的蛋白MART-1的抗原决定基。此外，抗MART-1或其与MHC I类分子(具体的，HLA A2的抗原决定基)结合的肽的主动或被动免疫治疗导致产生MART-1的黑素瘤细胞以及正常细胞的破坏。Y.Kawakami等人，J.Immunol.21：237(1998)。

新的癌抗原被期望能激发免疫反应，因为免疫系统将识别其为异己蛋白。然而，因为免疫系统对自身蛋白具有耐受性，其激发抵抗非突变的自身蛋白的免疫应答的能力是令人吃惊的。人们确信这种免疫应答直接抵抗通常不以足够的量暴露于免疫系统的来激发耐受性或免疫应答的表位。然而在癌中，这些决定簇不再避开免疫系统的检测。这点可能由通过MHC I类分子对表位增加的提呈产生的。

细胞介导的免疫应答涉及主要组织相容性复合物分子的活性。在人体中，复合物被称为“HLA”(“人白细胞抗原”)复合物。在小鼠中，其是指“H-2”复合物。主要组织相容性复合物包括3类蛋白，MHC I类、MHC II类和MHC III类。MHC I类分子几乎在所有有核细胞的表面上表达。其提呈抗原肽到Tc细胞(CD8+)。在人体中有3个MHC I类基因位点，HLA A，HLA B和HLA C。每一位点为高度多态的。因此，一个人在其细胞的表面可能有六种不同类型的HLA分子。MHC II类蛋白主要在抗原提呈细胞例如巨噬细胞、树突状细胞和B细胞上表达，其提呈被加工过的抗原肽到T_H细胞。在人体中有3个MHC II类基因位点，HLA DP，HLA DQ和HLA DR。MHC III类蛋白与各种的免疫过程相关，包括可溶性血清蛋白，以及补体系统的组分和肿瘤坏死因子。J.Kuby，Chapter 9，IMMUNOLOGY，第三版W.H.Freeman and Company，New York(1997)。

在癌细胞和正常细胞中，MHC I类分子将自身蛋白的表位提呈到Tc细胞。HLA A，HLA B和HLA C分子结合大约长为8到10氨基酸的具有特殊锚定残基的肽。HLA I类分子识别的锚定残基依赖于HLA分子的特定等位形式。CD8+T细胞带有能识别当被在细胞上的特定HLA分子提呈时细胞上的特异性表位的T细胞受体。当能被抗原提呈细胞刺激变为细胞毒性T淋巴细胞的Tc细胞接触带有HLA-肽复合物的细胞时，CTL与此细胞形成结合物并将其破坏。

肽通过MHC I类分子的提呈包括内源产生的蛋白通过蛋白酶体裂解为肽，通过ER和高尔基体进行加工，通过肽的锚定残基结合到MHC I类分子的裂口以及最终提呈到细胞的表面。除其它因素外，依据特定的锚定残基，某些肽可更紧密的结合于特定的HLA分子。结合较好的肽指“显性”表位，而结合较差的肽成为“亚显性”或“阴性”表位，自身蛋白或外源蛋白的显性表位激发强烈的耐受性或免疫应答。亚显性或阴性的表位产生弱的或根本不产生免疫应答。假设显性表位与HLA分子的紧密结合导致它们在细胞表面密集提呈，产生更多的与免疫细胞反应的机会以及更多的激发免疫应答或耐受性的可能性。