[发明专利]利用小单孢菌将密实菌素羟基化为普伐他汀

权利要求书

1.一种通过浸没培养在有氧条件下能够对式(II)化合物进行6β-羟基化的小单孢菌属菌株并分离和纯化在生物转化过程中形成的式(I)化合物，由通式(II)的化合物制备式(I)化合物的微生物方法，

其中R代表碱金属或铵离子，该方法包括以下步骤：

(a)在25-32℃下在一种含有可利用的碳源和氮源以及无机盐的营养培养基上培养小单孢菌属菌株，该菌株能够对式(II)化合物进行6β-羟基化，其中R如上所定义，然后

(b)将需要被转化的底物添加到生长中的培养物中，然后

(c)对底物进行羟基化直至完成生物转化，然后

(d)从培养液中分离式(I)化合物，如果需要，纯化该化合物。

2.如权利要求1所述的方法，其中使用保藏在匈牙利布达佩斯国立农业和工业微生物和细胞保藏中心的、保藏号为NCAIM(P)B001268的小单孢菌属菌株IDR-P₃或其能够对通式(II)化合物进行6β-羟基化的突变株。

3.如权利要求1所述的方法，其中使用保藏在匈牙利布达佩斯国立农业和工业微生物和细胞保藏中心的、保藏号为NCAIM(P)B001271的绛红小单孢菌菌株IDR-P₄或其能够对通式(II)化合物进行6β-羟基化的突变株。

4.如权利要求1所述的方法，其中使用保藏在匈牙利布达佩斯国立农业和工业微生物和细胞保藏中心的、保藏号为NCAIM(P)B001272的棘孢小单孢菌棘孢亚种菌株IDR-P₅或其能够对通式(II)化合物进行6β-羟基化的突变株。

5.如权利要求1所述的方法，其中使用保藏在匈牙利布达佩斯国立农业和工业微生物和细胞保藏中心的、保藏号为NCAIM(P)B001273的黑孢小单孢菌黑色亚种菌株IDR-P₆或其能够对通式(II)化合物进行6β-羟基化的突变株。

6.如权利要求1所述的方法，其中使用保藏在匈牙利布达佩斯国立农业和工业微生物和细胞保藏中心的、保藏号为NCAIM(P)B001274的蔷薇小单孢菌菌株IDR-P₇或其能够对通式(II)化合物进行6β-羟基化的突变株。

7.一种如权利要求1至6之任意一项权利要求所述的方法，其中通过如下方式从培养液中分离在发酵过程中形成的式(I)化合物：利用阴离子交换树脂进行吸附或利用与水不相溶的有机溶剂进行提取，然后制备作为中间体的式(I)化合物的内酯衍生物或其仲胺盐，或采用非离子吸附树脂的色谱分离方法纯化从所述发酵液的有机溶剂提取物中获得的碱性含水提取物。