[发明专利]杂交肽调制免役反应

说明书

本发明的背景

免役系统通过识别“外源”或“异常”结构作为抗原对外源病原体，肿瘤细胞，自身免役性疾病诱导的过程，变应原，及移植体应答。这些抗原大部分是蛋白质，其可通过宿主细胞合成，或通过病原体合成。这种抗原可加工成(蛋白酶解)肽片段，其可在抗原呈递细胞表面上的肽呈递结构中应答免役系统的淋巴细胞呈递。这些肽呈递结构称为主要组织相容性复合体(MHC)分子。它们有这样的名称是由于它们首先被识别为在MHC基因座中的多态等位基因的产物，这些基因控制着鼠同系繁殖菌株中的移植体排斥。

为了区别从“非自身”分子衍生的肽及从“非自身”分子的衍生肽衍生的肽，动物已经发展出这种复合体方法以呈递及识别抗原。本发明涉及在免疫应答的第一步中使用这种基本过程的物质和方法。本文还公开了加强将所选取的抗原肽加入到某些MHC分子中作为免役系统疫苗的化合物和方法。这样的疫苗将增强对抗外源侵入病原体，或肿瘤细胞的毒性反应。使用本发明化合物的其他方法，也可用来增强对自身的识别作用，以控制自身免疫疾病，变应性疾病，或移植体排斥。

对特异抗原的免疫应答是由识别MHC分子中这些抗原肽片段的T淋巴细胞调节。在抗原呈递细胞(APC)中，蛋白酶解处理的抗原的肽片段结合在主要组织相容性复合体细胞(MHC)分子的抗原肽结合位点中。然后将这些肽-MHC复合体转运到细胞表面通过应答T淋巴细胞上的T细胞受体来进行识别作用(外源肽和呈递MHC分子的邻接表面)。这T淋巴细胞可以具有免疫调节功能(辅助或抑制免疫应答)或效应子功能(如通过细胞毒性免疫应答来清除病原体或肿瘤)。抗原-特异识别事件启动免疫应答级联，免疫应答级联产生保护性免疫应答，或在自身免疫过程中，产生有害免疫应答。

两种类型的MHC分子作为T细胞的抗原肽的免疫系统呈递者。在内质网中在大约MHC I类分子合成时，MHC I类分子从内源合成的蛋白质接收肽，如传染性病毒。在细胞表面MHC I类结合抗原肽呈递给CD8-正性细胞毒性T淋巴细胞，然后其被激活并能直接杀死表达病毒的细胞。相反，MHC II类分子是在内质网合成的，它们的抗原肽结合位点被不变链蛋白质(Ii)阻断。MHC II类分子和Ii蛋白质的这些复合体从内质网转运到后-Golgi区室，其中Ii由蛋白质水解释放，特异抗原肽与MHCII类分子结合(Blum等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA85：3975(1988)；Riberdy等人，自然360：474(1992)；Daibata等人，Mol.Immunol.31：255(1994)；Xu等人，Mol.Immunol.31：723(1994)；Xu等人，Antigen Processing and Presentation，AcademicPress，NY p227(1994)；Kropshofer等人，科学270：1357(1995)；Urban等人，J.Exp.Med.180：751(1994))。

R.Humphreys(1996)美国专利No.5,559,028和Humphreys等人(1999)美国专利No.5,919,639揭示了Ii蛋白质裂解的机理，在裂解过程中释放出片段来调节MHC II类分子的抗原结合位点内的抗原肽的结合和禁闭(Adams等人，Eur.J.Immunol.25：1693(1995)；Adams等人，Arzneim.Forsch./药物研究47：1069(1997)；以及Xu等人，Arzneim.Forsch./Drug Research in Press(1999))。Ii蛋白质的一个片段，Ii(77-92)，发现在抗原肽结合位点外接近保持抗原肽的N-末端的位点的末端的变构象位点上起作用。并且，所引用的专利还公开了通过三种类型的机理控制免疫应答的这种起始调节的、抗原肽识别事件的新型治疗化合物和方法。在第一种机理中，通过本发明的化合物的作用抗原肽从细胞表面MHC II类分子溢出。

在第二种机理中，本发明的化合物改善这些分子上的抗原肽结合位点结合其他合成肽的荷电。这种插入肽序列可以是抗原表位或是仍然牢固结合以阻断抗原肽结合位点的非抗原肽序列。第三种机理包括用调节应答T淋巴细胞的分化和功能的方式，改变抗原肽从这些复合体的缔合/解离速度，以及MHC分子/抗原肽/T细胞受体复合体的三分子组成的相互作用属性，并且还改变三分子复合体与辅助细胞-细胞相互作用分子的相互作用。