[发明专利]碱性芽孢杆菌淀粉酶

权利要求书

1.一种α-淀粉酶，它是：

a)一种由芽孢杆菌NCIMB 40916菌株产生的多肽，或

b)一种具有SEQ ID NO：2的1-556位所示氨基酸序列的多肽，或

c)一种由克隆在大肠杆菌DSM 13001(NN049489)的质粒上的DNA序列中所述α-淀粉酶编码部分所编码的多肽，或

d)在(a)或(b)中定义的多肽的类似物，其

  (i)与所述多肽至少有60％的同源性，或

  (ii)是从所述多肽通过一或多个氨基酸的取代，缺失和/或插入而得的多肽。

2.一种α-淀粉酶，在37℃测定时，其在pH10.5下的活性比pH7.3下的高至少2倍。

3.一种α-淀粉酶，在37℃测定时，其在pH9.5下的活性比pH7.3下的高至少4倍。

4.一种α-淀粉酶，在37℃测定时，其最佳pH约为9.5。

5.前述任一项权利要求的α-淀粉酶，其得自芽孢杆菌，优选芽孢杆菌NCIMB 40916菌株。

6.前述任一项权利要求的α-淀粉酶，其中3g/I的实验洗涤剂溶液中25℃下温育20分钟后，其活性还保留了90％以上，所述实验洗涤剂含有20％的STPP，25％Na₂SO₄，15％Na₂CO₃，20％LAS，5％C12-C15脂肪醇乙氧基化物，5％Na₂Si₂O₅，0.3％NaCl，pH10.5，German硬度为6，同一种溶液中30℃温育20分钟后其活性保持小于90％。

7.前述任一项权利要求的α-淀粉酶，SDS-PAGE测定其分子量约为55kDa。

8.前述任一项权利要求的α-淀粉酶，等电聚焦测定其等电点约为5。

9.前述任一项权利要求的α-淀粉酶，其在洗涤剂添加剂的形式中为非粉尘状颗粒或稳定液体。

10.一种分离的DNA序列，其编码前述任一项权利要求的α-淀粉酶。

11.一种分离的DNA序列，其编码一种α-淀粉酶并包含：

a)SEQ ID NO：1的94-1764位所示的DNA序列，或

b)在a)中定义的DNA序列的类似物，其

  i)与该DNA序列有至少60％的同源性，或

  ii)在至少55℃下与该DNA序列杂交。

12.权利要求10或11的DNA序列，其来自细菌，优选来自芽孢杆菌属，最优选来自NCIMB 40916菌株。

13.含有权利要求10-12中任一项的DNA序列的重组表达载体。

14.由权利要求10-12中任一项的DNA序列或权利要求13的重组表达载体转化的细胞。

15.权利要求14的细胞，其是原核细胞，具体是细菌细胞或最初产生该DNA序列的内源细胞。

16.权利要求15的细胞，其中所述细胞属于芽孢杆菌属或埃希氏菌属，优选大肠杆菌。

17.生产α-淀粉酶的方法，其包括在允许所述α-淀粉酶产生的条件下培养权利要求14-16中任一项的细胞，然后从培养液中回收该α-淀粉酶。

18.生产前述任一项权利要求的α-淀粉酶的方法，其包括在合适的营养培养基中培养能生产淀粉酶的芽孢杆菌属菌株，然后从培养液中回收该α-淀粉酶。

19.一种包含权利要求1-9中任一项的α-淀粉酶和一种表面活性剂的洗涤剂组合物。

20.前述权利要求的洗涤剂组合物，其水溶液的pH值为8.5-11，优选pH9-10.5。

21.权利要求19或20的洗涤剂组合物，其是衣物洗涤剂。