[发明专利]与疾病相关的基因用途

说明书

技术领域

本发明涉及与疾病相关的基因的用途。更详细地涉及针对与疾病相关的基因的、用作诊断支气管哮喘和慢性阻塞性肺部疾病等标记物的反义核苷酸，针对该与疾病相关的基因产物的抗体以及用于筛选该与疾病相关的基因产物药物的方法等。

技术背景

支气管哮喘是呼吸道的慢性炎症，表明呼吸道狭窄，症状表现为发作性呼吸困难，哮喘，咳嗽。其起始症状和病情的进展与呼吸道的上皮细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等多种细胞有关。支气管哮喘最重要的特征之一是呼吸道对刺激反应敏感(过敏性呼吸道)。这种过敏性被认为是主要与浸润呼吸道内的嗜酸性粒细胞等分泌的化学传递物质导致呼吸道上皮剥离而引起的呼吸道炎症，但是更倾向于这种炎症与复杂的遗传因素及环境因素有关。

若从外界来的刺激(过敏原，排除物)和病毒等引起的呼吸道炎症，则在呼吸道上皮细胞和支气管周边的毛细血管内皮细胞上将有粘着分子进行表达，如VCAM-1和ICAM-1等[(J.Allergy Clin.Immunol.)，第96卷，第941项(1995)]，并产生细胞因子和化学游走物质。支气管哮喘的患者其Th2型辅助T细胞的机能产生亢进，其中Th2型细胞因子包括IL-3、IL-4、IL-5、IL-13、GM-CSF等，和趋化因子包括eotaxin、RANTES等增加。IL-4和IL-13对IgE具有诱导作用，同时IL-3和IL-4对肥大细胞的增殖具有诱导作用。IL-5、GM-CSF等可使嗜酸性粒细胞增殖分化，eotaxin、RANTES可使呼吸道发生浸润现象[(Allergy Asthma Proc.)，第20卷，第141项(1999)]。

覆盖在气管或支气管上的黏膜上皮细胞不仅具有屏障作用以及排除分泌物或异物的作用外，而且还能控制由于上皮分泌的平滑肌迟缓因子对气管的收缩作用，所述屏障作用是指为了防止从外界来的刺激直接传递到黏膜下部的组织内。浸润到支气管哮喘患者呼吸道的嗜酸性粒细胞以脱颗粒的方式释放细胞内的颗粒蛋白[(Compr.Ther.)第20卷，第651项(1994)]，其中包括活化的MBP(主要为碱性蛋白)和ECP(嗜酸性粒细胞阳离子蛋白)等。这些颗粒蛋白对上皮细胞具有杀伤作用使上皮细胞脱落损伤。由于上皮细胞的剥离使感觉神经末梢露出，上皮通透性亢进，造成上皮分泌的平滑肌弛缓因子的丧失。另外，嗜酸性粒细胞产生的白三烯(LTC4)和血小板活化因子(PAF)可使支气管平滑肌紧张度亢进。以上这些变化慢慢地引起重复性发作进而可导致支气管壁加厚，成为过敏性呼吸道。

如众所周知，上述细胞因子和粘着分子的基因表达不断增加与呼吸道炎症相关，然而在肺或支气管病变的部位进行表达并系统地分析基因的变化与呼吸道过敏性的产生以及相互关系至今尚无报道。

另一方面，有关氯离子通道和疾患的关系仅有以下两个报道，即CFTR与囊胞性纤维症的关系(科学，257卷1125页(1992)))，CIC氯离子通道与肌肉紧张症的关系(自然，354卷304页(1991))，然而关于钙依赖性氯离子通道与支气管哮喘等疾病之间的关系未见报道。

本发明来源于人CLCA1cDNA和蛋白质以及来源小鼠的Gob-5cDNA和蛋白质虽然有文献报道(Genomics 54卷200页(1998)，Biochem Biophys ResCommun 255卷347页(1999))，但是这些DNA或蛋白质与支气管哮喘、慢性阻塞性肺部疾病之间的关系完全没有描述。

本发明提供用于筛选具有抑制蛋白质活性化合物的方法以及该筛选法获得的化合物等，所述蛋白质在呼吸道过敏性产生亢进的肺、支气管上表达增加。

发明内容

本发明人为了解决所述的技术方案反复钻研终于从肺或支气管的哮喘型小鼠模型中发现与之相关的基因表达显著增加。我们详细研究了这个cDNA表达类型，结果证实，过敏性呼吸道炎症是通过呼吸道上皮细胞而被诱导表达的。

本发明人根据这些建树经过反复研究，最终完成了本发明的技术课题。

因此，本发明涉及：

(1)一种反义核苷酸，其具有与编码蛋白质或其部分肽的DNA序列互补或基本互补的碱基序列，所述蛋白质或其部分肽含有与SEQ ID NO：1所示氨基酸序列相同或基本相同的序列；

(2)如(1)所述的反义核苷酸，其中与SEQ ID NO：1所示氨基酸序列基本相同的序列为SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；