[发明专利]一种新的多肽——人小分子细胞核核蛋白9.9和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人小分子细胞核核蛋白9.9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核生物中mRNA的转录与加工过程较为复杂，真核生物中大多数编码蛋白质的结构基因是不连续的基因，存在内含子，在RNA聚合酶II的作用下，这些内含子与外显子一起被转录，因此mRNA的原初转录产物是分子量较大的前体——异质性RNA(hnRNA)。异质性hnRNA经过加工，即5’加帽，3’加多聚A及内含子的剪切和外显子的拼接等过程，产生有功能的成熟的mRNA，释放至细胞质中。

内含子的剪切与外显子的连接过程是多步骤的，而且需要多种因子参与。实验表明实在一个大小约为60S，由多种小分子细胞核核蛋白颗粒(U1-U6 snRNP，small nuclear ribonucleoprotein particles)和多种蛋白质的复合物被称为剪切体的作用下完成的。SnRNA是细胞核中存在的另一类小分子RNA，在代谢上非常稳定，一般常见的snRNA以U1-U6表示，除U6 snRNA被RNA聚合酶III转录外，其他U1～U5 snRNA均在RNA聚合酶II催化下形成。存在有转录后成熟的过程。SnRNA不游离存在，它们同特有的蛋白质结合成复合物，即小分子核糖核蛋白颗粒(snRNP)。

试验表明，小分子核糖核蛋白在RNA前体的剪切过程中有重要作用。如在mRNA前体剪切作用中，U1 snRNA5’端和mRNA前体内含子5’端保守序列互补，U1 snRNA和U2 snRNA分别于mRNA前体内含子5’剪切位点和内含子分子位点碱基配对形成了复合物，同时，U4、U6 snRNA彼此间碱基配对，含有与U5 snRNP结合成复合物，并与上述mRNA前体和U1、U2 snRNP的复合物结合，形成一个高分子量的60S的剪切体。剪切体完成mRNA前体的剪切过程。

试验表明，准确的进行mRNA前体剪切过程在维持正常审理功能中发挥了重要的作用，在一切遗传疾病如在β-地中海贫血病中发现，β-珠蛋白mRNA前体存在不正常的剪切与加工。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人小分子细胞核核蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人小分子细胞核核蛋白9.9。

由于如上所述人小分子细胞核核蛋白9.9蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人小分子细胞核核蛋白9.9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人小分子细胞核核蛋白9.9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人小分子细胞核核蛋白9.9以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人小分子细胞核核蛋白9.9的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人小分子细胞核核蛋白9.9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人小分子细胞核核蛋白9.9的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人小分子细胞核核蛋白9.9的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人小分子细胞核核蛋白9.9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人小分子细胞核核蛋白9.9异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中278-550位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2704位的序列。