[发明专利]一种新的多肽——信号肽酶9.79和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——信号肽酶9.79，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

信号肽酶是一种将信号肽从分泌蛋白上切除的一种多肽。在原核生物中，有三种类型的信号肽酶：lepB基因编码类型I信号肽酶，该类型信号肽酶负责大多数输出前蛋白的加工过程：lsp基因编码类型II信号肽酶，它只加工脂蛋白，第三种类型的信号肽酶加工毛亚基。

信号肽酶I是一种整合膜蛋白，它依靠一个或两个N端转膜结构域锚定于细胞质膜，同时其蛋白的主要部分则定位于璧膜间隙。一个丝氨酸和一个赖氨酸是信号肽酶催化反应所必须的两个氨基酸残基(Sung M.etal.，J.Biol.；Chem.267：13154-13159)。

信号肽酶I在进化上与酵母线粒体内膜蛋白水解酶亚基1和亚基2有关。酵母线粒体内膜蛋白水解酶亚基1和亚基2催化信号肽的解离，这些信号肽引导分泌蛋白从线粒体基体穿过内膜，到达内膜空间(Nunnari J.etal.，Science.262：1997-2004)。

在真核生物中，信号肽的解离受一个寡聚酶复合体的影响。这个寡聚酶复合体至少由5个亚基组成，这5个亚基组成信号肽酶复合体(SPC)。SPC定位于内质网膜。哺乳动物SPC的两个组成成分，SPC18和SPC21亚基以及酵母SEC11亚基都有一个共同的区域与原核生物信号肽酶I和酵母IMP1/IMP2相似。

信号肽酶I和IMP1/2共同组成的家族蛋白有三个共同特征。第一个特征是可能的丝氨酸激活位点；第二个特征是可能的赖氨酸的激活位点，这个激活位点在SPC亚基中并不是保守的；第三个特征是位于C末端的目前还不知道其生物学意义的但在信号肽酶I家族所有蛋白中都保守的区域。

信号肽酶I和IMP1/2共同组成的家族蛋白有对应于以上三个共同特征有以下三个共同序列：1.[GS]-X-S-M-X-[PS]-[AT]-[LF]其中，S是一个氨基酸残基的激活位点；2.K-R-[LIVMSTA](2)-G-X-[PG]-G-[DE]-X-[LIVM]-X-[LIVMFY]其中，K是一个氨基酸残基的激活位点，但IMP2不含该序列；3.[LIV MFYW](2)-X-(2)-G-D-[NH]-X(3)-[SND]-X(2)-[SG]。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与信号肽酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为信号肽酶9.79。

由于如上所述信号肽酶9.79蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的信号肽酶9.79蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新信号肽酶9.79蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——信号肽酶9.79以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码信号肽酶9.79的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码信号肽酶9.79的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产信号肽酶9.79的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——信号肽酶9.79的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——信号肽酶9.79的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与信号肽酶9.79异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。