[发明专利]一种新的多肽——运输蛋白13.53和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人Yip1p-13.53(运输蛋白)，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

所有蛋白质和处于分泌性细胞器与细胞内吞途径之间的细胞膜运输都有一个复杂的调节机制。这个复杂机制保证了小泡蛋白运输的特异性和直接性，同时亦保证了细胞器之间的膜物质动态平衡。实验证明，不管是特殊运输步骤的特异性蛋白还是在不同运输步骤中的具有相似功能的蛋白都参加了小泡运输[Rothman，J.E.and Wieland，F.T.(1996)Science，272，227-234]。这些蛋白中的一些蛋白在进化上高度保守[Bennett，M.K.andScheller，R.H.(1994)Annu.Rev.Biochem.，63，63-100]。这些蛋白是Ypt/Rab家族的同数GTP酶，Ypt/Rab家族成员在小泡对接以及膜融合过程中起决定性作用[Lazar，T.，GOETTE，m.AND Gallwitz，D.(1997)TrendsBiochem.Sci.，22，468-472]。GTP酶在转运过程中与小泡蛋白融合作为小泡蛋白的一部分运输，所以这个过程是短暂的并难以通过生物化学的方法来研究。但是用双杂交的方法就能够研究这种蛋白与蛋白之间的反应。因此，生物学家就运用酵母双杂交的方法来研究酵母GTP酶Ypt1p和Ypt31p。这两个GTP酶是蛋白质从内质网到高尔基体以及高尔基体内部所必须的。在研究过程中发现了一个27kDa的蛋白Yip1p，它特异结合于野生型GTP酶，但不是Ypt6p或Ypt7p。Yip1p参与与两个YptGTP酶的特异性膜结合，该结合过程贯穿于整个生物合成阶段。

Ypt/Rab GTP酶是膜运输在分泌特定阶段和细胞内吞运输过程中所必不可少的调节子[Novick，P.and Zerial，M.(1997)Curr.Opin.Cell Biol.，9，496-504]。Yip1p是一个完整的膜蛋白并特异结合于两个不同的GTP酶，Ypt1p和Ypt31p。Yip1p特异结合这两个GTP酶后将他们转运至高尔基膜，其实Yip1p就是一个GTP酶受体。

Yip1p有完整膜蛋白所具有的一切结构特征，例如占据半个分子大小位于C末端的跨膜结构域，其N末端朝向细胞质[Xiaoping Yang，Hugo T.et al.，(1998)EM BO J sep 1；17(17)：4954-4963]。Yip1p以非常稳定的形式存在于高尔基膜上并在内质网内高度表达。

本发明的人的多肽与Yip1p在蛋白质水平上有41％的相同性和60％的相似性，并且具有与Yip1p相似的保守特征性序列片段。基于以上各点故认为本发明的新基因与编码Yip1p相似的基因，命名为人Yip1p13.53，并推测其具有相似的生物学功能。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人Yip1p的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人Yip1p13.53。

由于如上所述人Yip1p13.53蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人Yip1p13.53蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人Yip1p13.53蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人Yip1p13.53以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Yip1p13.53的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Yip1p13.53的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人Yip1p13.53的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人Yip1p13.53的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人Yip1p13.53的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人Yip1p13.53异常相关的疾病的方法。