[发明专利]一种新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

分泌糖蛋白的多肽合成由以下两个修饰步骤组成：蛋白多聚肽链的折叠与聚集及低聚糖N端修饰与空间构型的组成。其中，蛋白多聚肽链的折叠与聚集由糖蛋白葡萄糖基转运酶(UDP-glucose)催化来完成，在该酶的催化作用下，形成了具有正常空间构型的分泌糖蛋白，为糖蛋白发挥正常的生物学功能提供了前提条件。

人们已从各种不同的生物中克隆得到了不同的糖蛋白葡萄糖基转运酶，这些酶构成了一独立的酶家族。1995年，Carol G.Parker等人从果蝇胚胎组织分离、克隆得到了糖蛋白葡萄糖基转运酶，该酶在生物体内催化将[14C]葡萄糖从UDP-[14C]葡萄糖转运至各种细胞外基质中的糖蛋白，以完成对这些蛋白的修饰，并使之形成特定的空间构型，以发挥其生理学功能[Carol G.Parker，Liselotte I.Fessler et al.，1995，EMBO J，14：1294-1303]。该酶蛋白序列与许多糖基转运蛋白不同，而其与一些细菌脂多糖甘油转运酶有较高的相似性。

对不同来源的糖蛋白葡萄糖基转运酶的蛋白序列进行比较发现，各种糖蛋白葡萄糖基转运酶的序列中含有许多相似的序列片段，其中一些是高度保守的、不变的区域，如有三个疏水性区域、(K/R)X(I/L)(Y/F)XDAD及DQDXXN，这些序列片段在该酶家族的成员中均是高度保守的，在蛋白活性构型的形成过程及作用过程中均起着重要的作用。这些位点的突变将直接导致蛋白的表达异常及其相关的蛋白修饰及合成过程的异常，从而引发各种相关的疾病。分泌糖蛋白在生物体内有着各种重要的作用，其通常调节着生物体内各种蛋白及物质的转运，其表达异常通常与一些相关的物质代谢紊乱性疾病、蛋白代谢紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。

本发明的新的人糖蛋白葡萄糖基转运酶与果蝇的糖蛋白葡萄糖基转运酶在蛋白水平上有35％的同一性和55％的相似性，且亦含有糖蛋白葡萄糖基转运酶家族其它成员所共有的各种特征性序列片段，两者均为糖蛋白葡萄糖基转运酶家族的成员，且具有相似的生物学功能。该蛋白在生物体内调控各种细胞内分泌蛋白的合成过程，其表达异常通常将导致分泌蛋白的合成异常，从而影响一系列与之相关的物质代谢过程。该蛋白通常与生物体内一些相关的发育紊乱性疾病、物质代谢紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人糖蛋白葡萄糖基转运酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01。

由于如上所述人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人糖蛋白葡萄糖基转运酶10.01异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。