[发明专利]一种新的多肽——人细胞色素组成蛋白14.19和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人细胞色素组成蛋白14.19，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞色素是一组具有色素的蛋白质，在细胞的电子转运过程中充当电子载体。这些蛋白把来自糖类，脂肪以及其他食物代谢而来的高能电子转变为ATP，驱动细胞多种需要能量反应的能量主要来源。细胞色素因血红素结合基团而彼此相关，该基团由包含紧密结合一个铁原子的卟啉环构成。铁原子作为真正意义上的电子载体，在接受一个电子时由铁变为亚铁。细胞色素从诸如NADH或是FADH2亚基的底物中接受电子，然后把它们传给类似细胞色素或泛素等其他电子载体。细胞色素根据吸收光谱鉴别因其与血红素基团的作用不同被分为亚组a，b，c。细胞色素a，a3亚基，b562亚基，b566亚基，c以及c1亚基都是哺乳动物中参与氧化磷酸化的线粒体膜呼吸链的成分。

细胞色素b5家族包括各种蛋白的血红素结合域。一系列氧化还原酶的结构由与b5的血红素结合域同源的血红素结合域及黄素脱氢酶或一个钼蝶呤域并列构成。在哺乳动物中已被发现的成员有两个：细胞色素b5及亚硫酸盐氧化酶。细胞色素b5被发现在线粒体和内质网中以膜结合形式存在，在红细胞中以可溶形式存在。膜结合形式与脂类  药物代谢以及涉及NADPH的羟基化反应有关，作为几种膜结合加氧酶的电子载体起作用。不同哺乳动物来源，包括来自人，马，鼠，兔，猪的细胞色素b5由一条约含135个氨基酸的多肽单链构成，该单链折叠成两个结构独立的区域。N-端域约1-96个氨基酸残基是一个极性催化域，血红素基团与之非共价结合，行使催化功能的主要是30-96位氨基酸。C-端疏水域，约自第96个残基至末端，是膜结合域，它把多肽链固定于线粒体膜上。人细胞色素b5的可溶形式缺乏C-端膜结合域。在哺乳动物中，血红素结合域是高度保守的，约有84％的相似性，而哺乳动物与鸟类在这一区域约有69％的相似性。b5有两种同源形式，一种在微粒体中发现，一种在线粒体外膜中发现。其中有两个丝氨酸残基作为血红素基的轴配体。

亚硫酸盐氧化酶，由钼蝶呤域及血红素结合域构成，位于线粒体膜间区，催化含硫氨基酸的氧化降解中的末端反应，并把细胞色素c作为生理电子受体。该蛋白是一种分子量为115KD的二聚体，每个单体中含有一个作为辅基的钼原子及一个[正铁]血红素。此外，细胞色素b5家族种的已知成员还包括酵母的乳酸脱氢酶，真菌，植物以及细菌的硝酸还原酶，果蝇肌蛋白TU-36B，裂殖酵母假拟蛋白SpAC1F12.10c，酵母假拟蛋白YMR073c，酵母假拟蛋白YMR272的血红素结合域。我们用包括两个组氨酸血红素配体中第一个配体的一段片段作为细胞色素b5家族血红素结合域的特征模板序列：[FY]-[LIVMK]-x(2)-H-P-[GA]-G[H是一个血红素轴配体]。

含有上述特征序列模板的多肽或该多肽的拮抗剂，激动剂及抑制剂可用于诊断  预防及治疗癌症  肌肉方面的疾病以及发育紊乱。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人细胞色素组成蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人细胞色素组成蛋白14.19。

由于如上所述人细胞色素组成蛋白14.19蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人细胞色素组成蛋白14.19蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人细胞色素组成蛋白14.19蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人细胞色素组成蛋白14.19以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞色素组成蛋白14.19的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人细胞色素组成蛋白14.19的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人细胞色素组成蛋白14.19的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人细胞色素组成蛋白14.19的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人细胞色素组成蛋白14.19的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。