[发明专利]一种新的多肽——人二氢嘧啶酶相关蛋白1－101.20和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

胺水解酶(DHPase)是参与尿嘧啶及胸腺嘧啶分解代谢的第二种酶。DHPase催化5，6-二氢尿嘧啶水解成为N-氨甲酰-beta-丙氨酸并催化5，6-二氢胸腺嘧啶水解成N-氨甲酰-beta-氨基异丁酸。DHPase还催化各种5，6-二氢嘧啶以及乙内酰脲与琥珀酰胺的水解。DHPase是一种四聚锌离子金属酶，含有具有酶活性的四个紧密相连的锌离子/分子。最近从人类胎脑中发现几种DHPase的人二氢嘧啶酶相关蛋白-1(DRP-1)，它们与DHPase具有高度同源性，且在氨基酸序列中有一段44个氨基酸序列的片段几乎完全保守，因而这些蛋白被称为人二氢嘧啶酶(DHPase)相关蛋白(DRPs)。人DHPase与DRPs构成一种新的基因家族且具有不同的组织分布，例如人DHPase位于肝脏及肾脏中；人DRP-1位于脑中；人DRP-2广泛表达于各种组织中，但不在肝脏中表达；人DRP-3主要位于心脏以及骨骼肌中(Kikugawa，M.，Kaneko，M.，Fujimoto-Sakata，S.，Maeda，M.，Kawasaki，K.，Takagi，T.and Tamaki，N.(1994)Purification，characterization and inhibition of dihydropyrimidinase.Eur.J.Biochem.219，393-399))。

人DRP-1的mRNA在脑中有很高的表达水平，并且与其他DRPs不同，DRP-1在其他物种中没有对应蛋白存在。DRP-1是一种多功能蛋白，具有酰胺水解酶以及其他类型的酶活性，参与基本的细胞进程，不被限制于仅在神经系统中起作用。DRP-1基因位于染色体4p15-16.1上，靠近亨廷顿舞蹈病位点。DRP-1发生缺失或突变会引发各种与尿嘧啶及胸腺嘧啶分解代谢相关的代谢疾病以及各种神经系统中的疾病，并与亨廷顿舞蹈病有关(Naoki Hamajima，Koichi Matsuda，ShigekoSakata，Nanaya Tamaki，Makoto Sasaki，Masaru Nonaka，Gene 180(1996)157-163)。

通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本发明的多肽的表达谱与人二氢嘧啶酶相关蛋白-1(DRP-1)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人二氢嘧啶酶相关蛋白-1(DRP-1)9.35。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人二氢嘧啶酶相关蛋白1的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20。

由于如上所述人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人二氢嘧啶酶相关蛋白1-101.20的抗体。