[发明专利]一种多肽——人磷酸三脂酶－22和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人磷酸三脂酶-22，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

微生物的磷酸三脂酶是一类锌金属酶，它催化包括有机磷杀虫剂和神经气体的一系列磷酸三脂复合物的水解，如：对硫磷，对氧磷和萨林等。磷酸三脂酶可以对那些被有机磷污染的工业和农业废物具有解毒功能，从而保护机体免受有机磷神经毒素的攻击。

细菌磷酸三脂酶可以水解含有磷酸三脂的有机磷农药。树脂毒素是一种香草醛类似物，它可以使伤害性神经元不敏感。用树脂毒素作标记，对一个小鼠的cDNA文库进行荧光检测，我们分离到了一种新的磷酸三脂酶的类似物，命名为rpr-1。体外翻译结果证明，rpr-1基因编码一个含349个氨基酸的蛋白，其分子量为39kDa。Northern印迹和原位杂交显示，rpr-1主要在肾的近端小管中表达，rpr-1的分布与其和树脂毒素结合的功能相关。研究结果显示，磷酸三脂酶家族与树脂毒素的毒性和药理学方面有着不容置疑的联系。(Jamie A.Davies，et.al，FEBSLetters，410：378-382，1997)

本发明的人的基因与磷酸三脂酶基因rpr-1在蛋白水平上有87％的同一性和93％的相似性。基于以上各点，故认为本发明的新基因为磷酸三脂酶基因，命名为{人磷酸三脂酶-22}。并以此推断其与磷酸三脂酶基因rpr-1相似，同为磷酸三脂酶基因家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人磷酸三脂酶-22蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人磷酸三脂酶-22蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人磷酸三脂酶-22蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人磷酸三脂酶-22以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷酸三脂酶-22的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人磷酸三脂酶-22的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人磷酸三脂酶-22的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人磷酸三脂酶-22的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人磷酸三脂酶-22的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人磷酸三脂酶-22异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少88％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中189-791位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1630位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人磷酸三脂酶-22蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人磷酸三脂酶-22蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。