[发明专利]一种多肽——帕内特细胞表达增强蛋白－43.78和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——帕内特细胞表达增强蛋白-43.78，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

小肠主要是由四种分化细胞组成，柱细胞、帕内特细胞、肠嗜铬细胞和杯型细胞。这些细胞被认为是由干细胞分化而来。帕内特细胞是一种末端分化细胞，是活性的分泌细胞，它是在小肠的小囊中的最低端区域中，是一种肠腺的嗜酸性细胞，常三五成群。胞质顶部充满粗大嗜酸性颗粒，内含溶菌酶。帕内特细胞的具体功能现在还没有明确的了解，但是有报道称，它可能在抵挡微生物中发挥了作用，它合成类似EGF的生长因子以及增强型因子；类似鸟苷蛋白，防卫素(动物细胞的内源性抗菌肽)-5以及溶菌酶的抗微生物剂；其他类似alpha1-抗胰蛋白酶，肿瘤坏死因子以及角蛋白。帕内特细胞的基因在肝脏中以及胃肠道的各处表达，倘若这种细胞发生变异或缺失则可能会引起各种癌肿。(Cheng H，Bjerknes M，Anat Rec 1996 Jan；244(1)：78-94；Komiya T，Tanigawa Y，HirohashiS.Biochem Biophys Res Commun.1998 Oct 29；251(3)：759-62)

目前，有大量的研究关于小肠上皮细胞中小囊绒毛轴中的基因表达，尤其是肠小囊中已经表达的基因的辨认。在辨认小囊中表达的基因，发现可以分为三种，在小囊绒毛中到处都有表达的基因，在绒毛中受到限制表达的基因，和在小囊中受到限制表达的基因。将前两种克隆，发现又进一步可以分为三种，表达水平始终如一的基因，表达水平逐渐减弱的基因，和表达水平逐渐增强的基因。(Cheng H，Bjerknes M，Anat Rec 1996 Jan；244(1)：78-94)

本发明的多肽与鼠帕内特细胞表达增强蛋白在蛋白水平上有89％的同一性及92％的相似性，且具有相似的生物学功能，因而被认为属于帕内特细胞的一种，命名为帕内特细胞表达增强蛋白-43.78。

由于如上所述帕内特细胞表达增强蛋白-43.78蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的帕内特细胞表达增强蛋白-43.78蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新帕内特细胞表达增强蛋白-43.78蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——帕内特细胞表达增强蛋白-43.78以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码帕内特细胞表达增强蛋白-43.78的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码帕内特细胞表达增强蛋白-43.78的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产帕内特细胞表达增强蛋白-43.78的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——帕内特细胞表达增强蛋白-43.78的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——帕内特细胞表达增强蛋白-43.78的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与帕内特细胞表达增强蛋白-43.78异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少76％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中108-1304位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1639位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。