[发明专利]一种多肽——人组氨酸去乙酰基酶－14.96和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人组氨酸去乙酰基酶-14.96，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在哺乳动物细胞中，基因和染色体蛋白结合，尤其是和组蛋白结合，基因表达的一个重要步骤是组蛋白的共价修饰，核心组蛋白的赖氨酸乙酰化/去乙酰化是这种共价修饰的重要形式之一，核心组蛋白的赖氨酸去乙酰基酶是染色质中RNA聚合酶及转录因子与DNA紧密结合包装物的重要成分(Brownell、Allis，1996)。[Cell，1997，89(3)：357-364]

组氨酸去乙酰基酶的表达水平和转录活性有较大相关，组氨酸乙酰化使染色质低盘绕聚缩，呈解螺旋状，以利于转录因子接近DNA(Lee et al.，1993)，核心组氨酸的超乙酰化激活基因表达，而亚乙酰化则抑制基因表达(Wolffe、Pruss，1996)，通过对特异基因组氨酸的乙酰化或去乙酰化能调节该基因的激活或抑制。许多具组氨酸乙酰转移酶活性的因子都是转录的联合激活因子。[Cell，1997，89(3)：357-364]

本发明的人的基因与组氨酸去乙酰基酶1基因HD1在蛋白水平上有79％的同一性和86％的相似性。且两者均含有组氨酸去乙酰基酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的新基因为组氨酸去乙酰基酶基因，命名为{人组氨酸去乙酰基酶-14.96}。并以此推断其与组氨酸去乙酰基酶1相似，同为组氨酸去乙酰基酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人组氨酸去乙酰基酶-14.96蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人组氨酸去乙酰基酶-14.96蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人组氨酸去乙酰基酶-14.96蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人组氨酸去乙酰基酶-14.96以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人组氨酸去乙酰基酶-14.96的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人组氨酸去乙酰基酶-14.96的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人组氨酸去乙酰基酶-14.96的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人组氨酸去乙酰基酶-14.96的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人组氨酸去乙酰基酶-14.96的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人组氨酸去乙酰基酶-14.96异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少80％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中42-452位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2197位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人组氨酸去乙酰基酶-14.96蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与人组氨酸去乙酰基酶-14.96蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。